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目的
评价七氟醚预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞肌质网功能的影响。
方法雄性健康成年SD大鼠,体重270~300 g,取离体心脏灌注模型制备成功的心脏24个,采用随机数字表法分为3组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚预处理组(SP组)。采用停灌30 min再灌注120 min的方法制备心脏缺血再灌注损伤模型。SP组于缺血前10 min时灌注含2.4%七氟醚的灌流液10 min。于再灌注5、10、15、30和60 min时记录左室发展压(LVDP)和左室舒张末压(LVEDP)。于再灌注前10 min时收集冠脉流出液,采用ELISA法测定LDH和cTnI水平。于再灌注120 min时,取心肌组织,采用TTC染色确定梗死体积,HE染色观察病理学结果,采用分光光度计测定心肌细胞肌质网钙ATP酶(SERCA2a)活性,采用Western blot法检测Bcl-2、Bax和SERCA2a的表达。
结果与C组比较,I/R组各时点LVDP降低,LVEDP升高,心肌梗死体积增加,冠脉流出液LDH和cTnI水平升高,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,SERCA2a表达下调且活性降低(P<0.01);与I/R组比较,SP组各时点LVDP升高,LVEDP降低,心肌梗死体积减小,冠脉流出液LDH和cTnI水平降低,Bax表达下调,Bcl-2表达上调,SERCA2a表达上调且活性增加(P<0.01),心肌病理学损伤减轻。
结论七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的机制可能与改善心肌细胞肌质网功能有关。