肼化辣根过氧化物酶糖蛋白染色法

来源 :上海医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lollipop7919
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探索一种简便灵敏的糖蛋白半定量法。在 pH 5.0,碳二亚胺(EDC)催化下,辣根过氧化物酶(HRP)与己二酰二肼反应生成肼化的HRP(HRP-HZ),固相于硝酸纤维素膜上的糖蛋白(纤连蛋白或转铁蛋白)经过碘酸氧化其糖链中的糖基后生成的醛基可与HRP—HZ缩合,用HRP的发包底物显色即可检出精蛋白的存在与否。结果:糖蛋白中,10 ng的糖即可被检出。结论:与其他糖定量方法相比,该方法灵敏度高,方法简便,能够普遍应用。 Explore a simple and sensitive semi-quantitative method of glycoprotein. At pH 5.0, catalyzed by carbodiimide (EDC), horseradish peroxidase (HRP) reacts with adipic dihydrazide to form hydrazinated HRP (HRP-HZ), immobilized on a nitrocellulose membrane On the glycoprotein (fibronectin or transferrin) by iodine oxidation of sugar chains in the sugar chain after the aldehyde group can be generated with HRP-HZ condensation, HRP hairpin substrate color can be detected protamine The existence or not. Results: In the glycoprotein, 10 ng of sugar can be detected. Conclusion: Compared with other quantitative methods, this method has high sensitivity, simple method and universal application.
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