论文部分内容阅读
摘 要：为有效控制猪瘟、猪口蹄疫和高致病猪蓝耳病疫情在武威市的发生和流行，寻求多种疫苗联合注射的新型免疫程序，缩短免疫周期，提高免疫质量，减轻劳动强度，节约免疫成本，为养猪业健康、稳定、和谐发展打下基础，具有十分重要的实际意义。
关键词：疫苗；抗体；对比试验
中图分类号：S852.4 3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2016）08-0032-02
随着武威市畜牧业的发展，猪的存栏量逐年上升，各种传染病也越来越多，给养猪业带来了不小的损失。为有效控制猪病在武威市的发生和流行，按照国家规定，对猪瘟、猪口蹄疫、猪高致病性蓝耳病必须进行强制免疫。国家制定的免疫方法免疫次数多，猪的应激反应也较大，也增加了乡村防疫工作量和强度，尤其在春秋集中免疫阶段，工作量则更大。为解决这一问题，寻求多种疫苗联合注射的新型免疫程序，分析评估其免疫的安全性和可行性，形成适合我市猪病防控的免疫新方法，对于缩短免疫周期，提高免疫质量，减轻劳动强度，节约免疫成本，为养猪业健康、稳定、和谐发展打下基础，具有十分重要的实际意义。
1 材料与方法
1.1 试验动物
选择品种一致，体重、日龄相近（30日龄以上），所有试验猪皆为猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）病毒和抗体阴性、猪瘟病毒和抗体阴性、健康仔猪105头。
1.2 试验地点
凉州区某养猪场。
1.3 试验器材
体温计、消毒药品、0.9 %的灭菌生理盐水、注射器、针头、药棉、采血器、耳标、耳标钳、实验室有关仪器和试剂等。
1.4 试验用疫苗
所用疫苗均为政府采购疫苗。
1.5 诊断液
试验用检测试剂盒购自深圳芬德生物技术有限公司（口蹄疫、猪瘟）、武汉科前动物生物制品有限责任公司（猪繁殖与呼吸综合征）。
1.6 方法
1.6.1 试验设计
对试验 105头猪进行随机分组，共7组，每组15头。具体注射剂量如下：
第一组15头：每头注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）。
第二组15头：每头注射1 mL猪口蹄疫灭活疫苗。
第三组15头：每头注射2 mL猪蓝耳病灭活疫苗。
第四组15头：每头同时注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）和规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗。
第五组15头：每头同时注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）和规定剂量的猪蓝耳病疫苗。
第六组15头：每头同时注射规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗和猪蓝耳病灭活疫苗。
第七组15头：每头同时注射规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗、猪蓝耳病灭活疫苗和1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）。
按说明量注射疫苗，注射后21 d、28 d、35 d，分别采集各组猪血清，用ELISA法测定各组免疫抗体水平。
1.6.2 免疫副反应观察
试验各组于免疫后观察各组猪的饮食状况，并且每天检测猪的体温并记录体温情况。
1.6.3 抗体检测
按照试剂盒操作技术进行。
2 结果与分析
2.1 试验各组的猪瘟抗体水平检测结果
将注射猪瘟疫苗的试验组的21 d、28 d、35 d的抗体进行检测，检测结果统计如表1。
由表1可知：试验各组抗体分别在21 d、28 d、35 d整齐均匀，呈现有规律的上升趋势。在免疫后21 d时，单独注射猪瘟活疫苗组的抗体水平高于其他3组，其余各组的抗体水平之间差异不显著。
2.2试验各组的猪蓝耳抗体水平检测结果
将注射蓝耳病疫苗的试验组的21 d、28 d、35 d 的抗体检测，检测结果统计如表2。
由表2可知：试验各组抗体水平在21 d、28 d、35 d均整齐均匀，呈现有规律的上升趋势。猪蓝耳病疫苗与口蹄疫疫苗同时注射后，所产生抗体效价在21 d、28 d和35 d均比单独注射猪蓝耳病灭活疫苗高，说明猪口蹄疫活疫苗可对蓝耳疫苗注射后有效抗体的产生达到积极协同作用，促进猪蓝耳病有效免疫抗体的产生。但是，同时免疫猪瘟活疫苗和猪蓝耳疫苗的组（第5组）的抗体水平低于单独注射蓝耳病灭活疫苗，说明共同免疫猪瘟和猪蓝耳疫苗时，两种疫苗会相互影响，使免疫效果不如单独免疫。
2.3 试验各组的猪口蹄疫抗体水平检测结果
将注射口蹄疫疫苗的试验组的 21 d、28 d、35 d的抗体检测，检测结果统计如表3。
由表3可知：试验各组分别在 21 d、28 d、35 d的抗体呈上升趋势。猪口蹄疫疫苗和猪蓝耳病疫苗同时注射后，口蹄疫疫苗所产生的抗体水平（OD值）最高，且一直呈上升趋势，优于口蹄疫疫苗单独注射所产生的抗体水平，更能促进口蹄疫抗体的产生。
2.4 各组免疫副反应结果与分析
七个试验组样本数相同，免疫副反应没有明显差异，第二组有2头猪、第四组、第六组、第七组分别有1头在注射后6 h内有减食、体温升高，经注射肾上腺素后，恢复正常，其余均无明显副反应，因此三种疫苗任意组合注射，不会增加免疫副反应。
3 讨论
根据试验结果得知：猪瘟、猪口蹄疫、猪蓝耳三种疫苗同时分点免疫注射的办法，可以获得较好的免疫效果，口蹄疫苗对蓝耳病疫苗有积极的协同作用，能促使猪蓝耳病抗体的产生，猪蓝耳疫苗对猪瘟疫苗抗体有明显的干扰，这样容易使猪群受到猪瘟野病毒的攻击而发病。为此，建议在农村少量散养户和小规模养殖场可以采用此种联合免疫的办法，注射猪瘟活疫苗，待产生抗体后再分点注射猪蓝耳和口蹄疫灭活疫苗。□□
关键词：疫苗；抗体；对比试验
中图分类号：S852.4 3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2016）08-0032-02
随着武威市畜牧业的发展，猪的存栏量逐年上升，各种传染病也越来越多，给养猪业带来了不小的损失。为有效控制猪病在武威市的发生和流行，按照国家规定，对猪瘟、猪口蹄疫、猪高致病性蓝耳病必须进行强制免疫。国家制定的免疫方法免疫次数多，猪的应激反应也较大，也增加了乡村防疫工作量和强度，尤其在春秋集中免疫阶段，工作量则更大。为解决这一问题，寻求多种疫苗联合注射的新型免疫程序，分析评估其免疫的安全性和可行性，形成适合我市猪病防控的免疫新方法，对于缩短免疫周期，提高免疫质量，减轻劳动强度，节约免疫成本，为养猪业健康、稳定、和谐发展打下基础，具有十分重要的实际意义。
1 材料与方法
1.1 试验动物
选择品种一致，体重、日龄相近（30日龄以上），所有试验猪皆为猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）病毒和抗体阴性、猪瘟病毒和抗体阴性、健康仔猪105头。
1.2 试验地点
凉州区某养猪场。
1.3 试验器材
体温计、消毒药品、0.9 %的灭菌生理盐水、注射器、针头、药棉、采血器、耳标、耳标钳、实验室有关仪器和试剂等。
1.4 试验用疫苗
所用疫苗均为政府采购疫苗。
1.5 诊断液
试验用检测试剂盒购自深圳芬德生物技术有限公司（口蹄疫、猪瘟）、武汉科前动物生物制品有限责任公司（猪繁殖与呼吸综合征）。
1.6 方法
1.6.1 试验设计
对试验 105头猪进行随机分组，共7组，每组15头。具体注射剂量如下：
第一组15头：每头注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）。
第二组15头：每头注射1 mL猪口蹄疫灭活疫苗。
第三组15头：每头注射2 mL猪蓝耳病灭活疫苗。
第四组15头：每头同时注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）和规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗。
第五组15头：每头同时注射1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）和规定剂量的猪蓝耳病疫苗。
第六组15头：每头同时注射规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗和猪蓝耳病灭活疫苗。
第七组15头：每头同时注射规定剂量的猪口蹄疫灭活疫苗、猪蓝耳病灭活疫苗和1头份猪瘟活疫苗（脾淋源）。
按说明量注射疫苗，注射后21 d、28 d、35 d，分别采集各组猪血清，用ELISA法测定各组免疫抗体水平。
1.6.2 免疫副反应观察
试验各组于免疫后观察各组猪的饮食状况，并且每天检测猪的体温并记录体温情况。
1.6.3 抗体检测
按照试剂盒操作技术进行。
2 结果与分析
2.1 试验各组的猪瘟抗体水平检测结果
将注射猪瘟疫苗的试验组的21 d、28 d、35 d的抗体进行检测，检测结果统计如表1。
由表1可知：试验各组抗体分别在21 d、28 d、35 d整齐均匀，呈现有规律的上升趋势。在免疫后21 d时，单独注射猪瘟活疫苗组的抗体水平高于其他3组，其余各组的抗体水平之间差异不显著。
2.2试验各组的猪蓝耳抗体水平检测结果
将注射蓝耳病疫苗的试验组的21 d、28 d、35 d 的抗体检测，检测结果统计如表2。
由表2可知：试验各组抗体水平在21 d、28 d、35 d均整齐均匀，呈现有规律的上升趋势。猪蓝耳病疫苗与口蹄疫疫苗同时注射后，所产生抗体效价在21 d、28 d和35 d均比单独注射猪蓝耳病灭活疫苗高，说明猪口蹄疫活疫苗可对蓝耳疫苗注射后有效抗体的产生达到积极协同作用，促进猪蓝耳病有效免疫抗体的产生。但是，同时免疫猪瘟活疫苗和猪蓝耳疫苗的组（第5组）的抗体水平低于单独注射蓝耳病灭活疫苗，说明共同免疫猪瘟和猪蓝耳疫苗时，两种疫苗会相互影响，使免疫效果不如单独免疫。
2.3 试验各组的猪口蹄疫抗体水平检测结果
将注射口蹄疫疫苗的试验组的 21 d、28 d、35 d的抗体检测，检测结果统计如表3。
由表3可知：试验各组分别在 21 d、28 d、35 d的抗体呈上升趋势。猪口蹄疫疫苗和猪蓝耳病疫苗同时注射后，口蹄疫疫苗所产生的抗体水平（OD值）最高，且一直呈上升趋势，优于口蹄疫疫苗单独注射所产生的抗体水平，更能促进口蹄疫抗体的产生。
2.4 各组免疫副反应结果与分析
七个试验组样本数相同，免疫副反应没有明显差异，第二组有2头猪、第四组、第六组、第七组分别有1头在注射后6 h内有减食、体温升高，经注射肾上腺素后，恢复正常，其余均无明显副反应，因此三种疫苗任意组合注射，不会增加免疫副反应。
3 讨论
根据试验结果得知：猪瘟、猪口蹄疫、猪蓝耳三种疫苗同时分点免疫注射的办法，可以获得较好的免疫效果，口蹄疫苗对蓝耳病疫苗有积极的协同作用，能促使猪蓝耳病抗体的产生，猪蓝耳疫苗对猪瘟疫苗抗体有明显的干扰，这样容易使猪群受到猪瘟野病毒的攻击而发病。为此，建议在农村少量散养户和小规模养殖场可以采用此种联合免疫的办法，注射猪瘟活疫苗，待产生抗体后再分点注射猪蓝耳和口蹄疫灭活疫苗。□□