观察热休克蛋白(HSP)47在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达及转化生长因子(TGF)-β₂对视网膜色素上皮(RPE)细胞HSP47表达的影响。

收集行玻璃体切割手术的PVR患者增生膜病理标本，苏木精-伊红、Masson及免疫组织化学染色，观察其组织病理特征及HSP47的表达。加入浓度分别为0、1、5、10 ng/ml的TGF-β₂刺激培养人RPE(ARPE-19)细胞，并根据此浓度此分为4组；浓度为5 ng/ml TGF-β₂刺激细胞0、12、24、48 h。荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内HSP47、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的mRNA和蛋白表达情况。

光学显微镜观察发现，PVR增生膜中可见类圆形上皮样细胞及色素颗粒，大量胶原蛋白成分；HSP47在多数上皮样细胞胞浆及间质内呈阳性表达。RT-PCR检测结果显示，1、5、10 ng/ml组细胞内HSP47、Col-ⅠmRNA表达较0 ng/ml组分别上调了1.32、2.35、1.85倍和1.29、1.52、2.11倍，差异均有统计学意义(HSP47：F＝27.21，P<0.05；Col-Ⅰ：F＝23.45，P<0.05)；TGF-β₂作用0、12、24、48 h后，细胞内HSP47、Col-ⅠmRNA表达较0 h分别上调了1.56、1.84、2.86倍和1.57、1.86、2.78倍，差异均有统计学意义(HSP47：F＝31.56，P<0.05；Col-Ⅰ：F＝54.43，P<0.001)。Western blot检测结果显示，1、5、10 ng/ml组细胞内HSP47、Col-Ⅰ蛋白表达较0 ng/ml组分别上调了2.33、2.89、2.60倍和1.18、1.49、2.11倍，差异均有统计学意义(HSP47：F＝39.78，P<0.05；Col-Ⅰ：F＝29.10，P<0.05)。TGF-β₂作用12、24、48 h后，细胞内HSP47、Col-Ⅰ蛋白表达量较0 h分别上调了2.08、2.37、2.80倍和1.38、1.59、2.16倍，差异均有统计学意义(HSP47：F＝49.18，P<0.05；Col-Ⅰ：F＝42.52，P<0.05)。

HSP47在PVR增生膜中呈阳性表达，TGF-β₂可能通过促进ARPE-19细胞HSP47的表达，增加Col-Ⅰ的合成与沉积。