肝癌组织及细胞系总RNA抽提逆转及基因克隆方法的改进与比较

来源 :动物学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：c1093682

【摘要】

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该文建立了高效肝组织及细胞总RNA抽提、反转录以进行基因克隆和实时定量PCR（q-RT-PCR）的方法。比较了2种反转录酶（M-MLV和SuperScriptII）、2种cDNA合成引物（OligodT和random 6 pr

【作者】

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易濒常宏曹毅

【机构】

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中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室,中国科学院研究生院

【出处】

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动物学研究

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

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肝癌组织及细胞系总RNA抽提反转录 q-RT-PCR 长片段基因克隆

【基金项目】

：

国家自然科学基金(30800407)

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该文建立了高效肝组织及细胞总RNA抽提、反转录以进行基因克隆和实时定量PCR（q-RT-PCR）的方法。比较了2种反转录酶（M-MLV和SuperScriptII）、2种cDNA合成引物（OligodT和random 6 primer）对总RNA反转录效率的影响,与4种DNA聚合酶（Taq聚合酶、Pfu聚合酶、LAtaq聚合酶、Prime Star聚合酶）进行长片段基因克隆的能力及效率;同时,该研究比较了不同质量总RNA对有效进行q-RT-PCR与长片段分子克隆的影响。新建立的RNA提取方法使得RNA完整

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