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[目的]探讨龟鹿二仙胶对化疗诱导的骨髓造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）衰老的影响及其相关机制。[方法]30只雄性昆明小鼠右腋部皮下注射肝癌细胞株H22细胞悬液0.1mL,细胞浓度为1.0×107个/mL,建立荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分为3组（对照组、模型组、龟鹿二仙胶组）,对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.2mL,1次/d,连续3d（d13）;其余两组小鼠均腹腔注射环磷酰胺100mg/（kg·d）,1次/d,连续3d（d13）。龟鹿二仙胶组小鼠同时给予龟鹿二仙胶9.5g/（kg·d）灌胃,1次/d,共9d（d19）;对照组和模型组同时予0.9%氯化钠溶液0.3mL连续灌胃,1次/d,共9d（d19）。给药结束后24h分离小鼠骨髓HSC,以衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal）染色检测HSC衰老情况,流式细胞术检测细胞周期,CCK-8检测细胞活力。Western blot检测p16Ink4a-Rb信号通路p16、CDK4/6、pRb蛋白的表达水平,q PCR检测p16、CDK4/6、pRb的mRNA表达水平。[结果]与对照组比较,模型组HSC的细胞活力明显降低（P<0.01）,SA-β-gal染色阳性率明显升高（P<0.01）,S期细胞比例明显升高（P<0.01）,p16蛋白的表达水平明显升高（P<0.01）,CDK4/6、pRb蛋白的表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,龟鹿二仙胶组HSC的细胞活力明显升高（P<0.05）,SA-β-gal染色阳性率明显降低（P<0.01）,S期细胞比例明显减低（P<0.01）,p16蛋白的表达水平明显降低（P<0.01）,CDK4/6、pRb蛋白的表达水平明显升高（P<0.01,P<0.05）。各组p16Ink4a-Rb信号通路上相关mRNA的表达差异无统计学意义（P>0.05）。[结论]龟鹿二仙胶能够改善化疗后HSC衰老,p16Ink4a-Rb信号通路上相关蛋白可能是其作用靶点,但对mRNA表达的影响有待进一步研究。