【摘 要】
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根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5＇RACE（rapid amplification of cDNA Ends）和3＇RACE技术得到
【机 构】
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上海师范大学生命与环境科学学院,中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本业务费（No.2012JB12）资助
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根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5＇RACE（rapid amplification of cDNA Ends）和3＇RACE技术得到全长基因。将该基因连入原核表达载体pGEX-4T-1,经IPTG诱导纯化得到重组蛋白。以镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱各发育阶段的cDNA为模板进行Real-timePCR实验。结果显示,SP30基因全长1194 bp,开放阅读框长900 bp,编码299个氨基酸,预计蛋白分子质量30
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