【摘 要】
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目的：探讨黄芪甲苷（astragaloside IV,ASIV）对棕榈酸（palmitic acid,PA）诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞铁死亡的调控作用。方法：选取对数生长期的RAW264.7细胞，加入终浓度为0、50、100、150和200 mg/L的ASIV，或0、100、200和400μmol/L的PA，细胞成像仪培养48 h后计数分析，观察ASIV和PA对RAW264.7细胞活力的影
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81874372）；
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目的：探讨黄芪甲苷（astragaloside IV,ASIV）对棕榈酸（palmitic acid,PA）诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞铁死亡的调控作用。方法：选取对数生长期的RAW264.7细胞，加入终浓度为0、50、100、150和200 mg/L的ASIV，或0、100、200和400μmol/L的PA，细胞成像仪培养48 h后计数分析，观察ASIV和PA对RAW264.7细胞活力的影响。再将RAW264.7细胞分为对照组、PA（200μmol/L）组和PA（200μmol/L）+ASIV（100 mg/L）组。油红O染色观察RAW264.7细胞脂质沉积情况；细胞免疫荧光染色观察RAW264.7细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）及铁蛋白重链1（ferritin heavy chain 1,FTH1）的蛋白表达水平；RT-qPCR和Western blot测定GPX4、FTH1、P53和溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）的mRNA和蛋白表达水平；活性氧（reactive oxygen species,ROS）荧光探针检测各组RAW264.7细胞ROS水平。结果：细胞成像仪筛选出200μmol/L和100 mg/L分别为后续实验中PA和ASIV的相对最佳浓度。与对照组相比，PA组细胞核缩小且不清晰，细胞质内可见弥漫性橘红色脂滴；细胞免疫荧光结果显示，PA组GPX4和FTH1蛋白平均荧光强度显著降低（P＜0.01）;PA组P53表达显著增加（P＜0.05）,SLC7A11、GPX4和FTH1表达均显著减少（P＜0.05）;PA组ROS水平显著增高（P＜0.05）。与PA组相比，PA+ASIV组细胞核部分恢复正常，细胞质内橘红色脂滴减少；PA+ASIV组GPX4和FTH1蛋白平均荧光强度显著升高（P＜0.01）;PA+ASIV组P53表达显著降低（P＜0.05）,SLC7A11和GPX4表达显著增加（P＜0.05）,FTH1蛋白表达未见显著差异（P＞0.05）;PA+ASIV组ROS水平显著降低（P＜0.05）。结论：ASIV能够抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞的脂质沉积，可能与调控铁死亡相关因子表达有关。
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