【摘 要】
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目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核
【机 构】
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西安交通大学医学院神经生物学研究所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,西安市中心医院,中国科学院生物物理研究所,中国海洋大学食品科学与工程学院
【基金项目】
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Supported by National Natural Science Foundation of China (30500575) and Sci-tech Development Program of Shaanxi Province (2005K13-G4).AcknowledgementsWe are grateful to Mr ZHA0 Tong-Xing and QI Cun-f
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目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blott
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