【摘 要】
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目的优化PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体以增加SOD融合蛋白表达。方法通过基因工程设计引物并优化PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,扩增并鉴定目的基因,将优化后的原核重组
【机 构】
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陕西省人民医院麻醉科,西安国际医学中心医院麻醉与舒适化医疗中心,北京大学第三医院麻醉科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81471131)。
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目的优化PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体以增加SOD融合蛋白表达。方法通过基因工程设计引物并优化PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,扩增并鉴定目的基因,将优化后的原核重组表达载体以热激法转化至E.coliBL21(DE3)中,通过IPTG诱导重组载体进行蛋白表达,通过溶菌酶+超声裂解菌体,离心后收集上清,利用Ni-NTA树脂纯化,10 kD,20k D透析袋浓缩,以获得SOD融合蛋白。利用SDS-PAGE凝胶电泳及Westernblot鉴定SOD融合蛋白。采用BCA与黄嘌呤氧化酶法测
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