四妙散对肩周炎患者成纤维细胞样滑膜细胞形态学的影响及促凋亡机制研究

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目的:探究四妙散对肩周炎患者成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)形态学的影响及促凋亡机制。方法:取不同浓度的四妙散溶液(10、20、40μg/ml)刺激FLS细胞,设置0μg/ml的空白对照组,各组培养24、48、72h,采用MTT法检测各组刺激后的FLS细胞变化情况,评估四妙散溶液对细胞增殖的抑制作用,采用倒置显微镜观察培养48h各组细胞的形态学变化情况,采用DAPI染色法观察各组FLS细胞凋亡情况,并采用Western blot检测各组促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Mcl-1的表达情况。结果:四妙散溶液在10~40μg/ml的浓度范围内可有效降低FLS细胞的存活率,且呈现时间和浓度依赖性(P<0.05);倒置显微镜下观察可见空白对照组的FLS细胞生长状态良好,随着四妙散溶液浓度的增加,细胞表面有棕褐色絮状物质形成,细胞增殖受到抑制,细胞密度随四妙散溶液浓度上升而降低(P<0.05);DAPI染色下空白对照组细胞核均匀淡染,胞膜完整,随着四妙散溶液浓度增加细胞膜通透性增加,细胞核固缩形态增加且有细胞核碎裂;随着四妙散溶液浓度的增加,Bax水平上调,Mcl-1水平下降,均呈现出浓度依赖性(P<0.05)。结论:四妙散溶液能够显著降低肩周炎患者FLS细胞的存活率,有一定的时间和浓度依赖性,作用机制可能是通过调节促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Mcl-1的表达来实现的。
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