【摘 要】
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利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)与限制性内切酶相结合的方法,设计4条含有限制性酶切位点和相应突变的引物.以马铃薯X病毒(PotatoVirusX,PVX)外壳蛋白cp
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金
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利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)与限制性内切酶相结合的方法,设计4条含有限制性酶切位点和相应突变的引物.以马铃薯X病毒(PotatoVirusX,PVX)外壳蛋白cp基因为模板,扩增出相应的片段,相应酶切后通过三片段连接构建到克隆载体pBlueKS(+/-)上.随机挑选重组子测序表明,利用三片段拼接成功地在PVX外壳蛋白基因的不同部位产生了突变.实验结果说明利用三片段接可以大大提高筛选得到突变子的效率,从而节省人力、物力和时间.
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