【摘 要】
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目的:检测ClC-2是否能被促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化,为进一步研究其在细胞增殖、分化过程中的调控机制提供基础。方法:从含有家兔ClC-2cDNA的质粒pSPORT1中PCR扩增ClC-2胞
【机 构】
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吉林大学第二医院眼科,吉林大学中日联谊医院胸外科,吉林大学中日联谊医院中心研究室
【基金项目】
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本研究为国家自然科学基金资助项目(30571993)
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目的:检测ClC-2是否能被促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化,为进一步研究其在细胞增殖、分化过程中的调控机制提供基础。方法:从含有家兔ClC-2cDNA的质粒pSPORT1中PCR扩增ClC-2胞浆内的羧基端DNA编码序列,构建重组载体pGEX-4T-1/ClC-2CT;重组质粒经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21菌株;经异丙基β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导后,通过Gluthathion Sepharose4B亲和层析柱纯化融合蛋白;并行融合蛋白的体外磷酸化实验。结果:酶切、测序鉴定重组载
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