【摘 要】
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目的 探讨性别决定基因-相关蛋白结构域4(SOX4)调控Wnt、转化生长因子-β(TGF-β)等信号通路及胞内外因子对肺癌细胞的影响及可能的分子机制.方法 构建pEX-2-SOX4过表达质粒
【机 构】
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厦门大学附属第一医院,厦门361003昆明医科大学第三附属医院(云南省肿瘤医院),昆明650118;教育部高原区域性高发肿瘤国际合作联合实验室,昆明650118;云南省肺癌研究重点实验室,昆明6501
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目的 探讨性别决定基因-相关蛋白结构域4(SOX4)调控Wnt、转化生长因子-β(TGF-β)等信号通路及胞内外因子对肺癌细胞的影响及可能的分子机制.方法 构建pEX-2-SOX4过表达质粒、GFP空载质粒、shRNA干扰质粒及shNC对照质粒;采用脂质体法对细胞进行转染,通过细胞生物学及分子实验验证过表达及沉默SOX4基因后上皮细胞-间充质转化(EMT)相关基因在转录与翻译水平的变化情况,以推测SOX4介导的EMT对细胞增殖、迁移与侵袭的可能机制.结果 细胞功能实验证实了SOX4能促进肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,伴有EMT正向调节因子N-钙黏蛋白(N-Cad)、纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)、Snail、ADAM28、β-catenin的表达增加,EMT抑制因E-Cad表达的下调,但过表达SOX4的16HBE、SK-MES-1细胞主要表现为EMT抑制因子Smad7、TJP1(ZO-1)、TJP2(ZO-2)、WIF1显著上调,而在沉默组中,前文所述因子表达水平与pEX-2-SOX4组相反.这些因子大都直接或间接通过Wnt及TGF-β通路参与肺癌EMT的调控.结论 SOX4可通过Wnt及TGF-β为代表的信号通路介导肿瘤细胞EMT的发生,促进肺癌的增殖、迁移与侵袭.
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