【摘 要】
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探讨了家兔窦房结(Sino-Atrial Node,SAN)细胞的分离方法及其形态和起搏电流(Funny Current,If)的特征.通过打结定位法确定了带有“中心结区”的家兔SAN组织条,双酶法分离SAN
【机 构】
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武汉大学人民医院心内科,武汉,430060;武汉市洪山区张家湾社区卫生服务中心,武汉,430070
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探讨了家兔窦房结(Sino-Atrial Node,SAN)细胞的分离方法及其形态和起搏电流(Funny Current,If)的特征.通过打结定位法确定了带有“中心结区”的家兔SAN组织条,双酶法分离SAN细胞,利用全细胞穿孔膜片钳技术记录SAN细胞的lf0.结果显示,SAN组织为上宽下窄的枣核型,区域体积约为6.25mmx2.23mmx0.26mm,或6mmx2mmx0.1 mm-6mmx2mmx3.3mm.SAN细胞成狭长梭形.无清晰横纹.细胞长(65.3±7.8)Nm,宽为(7.2±3.1)um.在正常Tyrode液中,可恢复规则自律性搏动,频率为(187.3±5.6)次/min.典型SAN细胞数,占整个分离细胞的2%-5%.根据电压钳制方案,If电流被引出,呈内向性斜坡状,随着钳制电压降低,起搏电流逐渐增大,并随钳制时间延长,倾斜度也增大.If带有明显尾电流,也随着超级化激活电位降低,逐渐增大.根据二者电流大小拟合的电流-电压曲线.呈典型横向Y形.本法获得SAN细胞形态典型,状态和活性良好,能够记录具有特征性的If,可供心血管领域有关针对SAN细胞lf研究的技术借鉴.
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