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间接ELISA在检测抗体中广泛应用，而封闭作为间接ELISA中必不可少的一步可直接影响试验的准确性。利用巴氏杆菌提取的包被抗原，经方阵滴定法确定抗原和血清的最佳工作浓度为1：400和1：100。而且通过对几种封闭液分别37℃水浴2h后4℃24h、4℃24h、37℃水浴3h封闭对比找出最佳的封闭条件为含0．5％BSA＋2％蔗糖的PBS封闭液在37℃水浴2h后4℃24h。