VEGF121-DFF40融合蛋白原核表达、纯化及体外抗肿瘤活性

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Seasonbaby
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目的在大肠杆菌中表达VEGF-DFF40基因并纯化融合蛋白,MTT法检测其体外抗肿瘤活性。方法用RT—PCR法扩增目的基因,两基因连接并在PET28a中表达,对产物进行SDS-PAGE电泳及Westem印迹分析;体外培养HepG2细胞,HUVEC细胞,用MTr法检测4种浓度VEGF—DFF40融合蛋白及PBS的细胞毒性。结果成功构建了重组表达质粒,并纯化出高纯度的融合蛋白,MTr法融合蛋白对两种细胞的直接作用与PBS组均有显著性差异(P〈O.01),提示此融合蛋白对两种细胞均有直接杀伤作用。结论本研究成功
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