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目的：建立一种能同时检测肉中金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门氏菌和单核增生李斯特菌的多重PCR检测方法。方法：根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因（nuc）、沙门氏菌的侵袭蛋白基因（invA）、志贺氏菌的侵袭性质粒抗原基因（ipaH）和单核细胞增生性李斯特菌的内化素基因（inlA）设计引物,通过优化好的反应体系进行多重聚合酶链反应（PCR）扩增目的基因。结果：特异性实验结果表明4种菌均能在相应位置扩增出特异性条带。对污染4种菌的猪肉进行检测,确定出金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检出限是102CFU/mL,志贺氏菌