抗菌肽cecropin P1在大肠杆菌中的融合表达及活性测定

来源 :食品与药品 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sinhuy258

【摘要】

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目的在大肠杆菌中融合表达抗菌肽cecropin P1。方法根据抗菌肽cecropin P1的氨基酸序列，依照大肠杆菌密码子的偏爱性，采用SOE技术合成cecropin P1的编码基因；将其克隆至表达载体

【作者】

：

翟琼叶江莫剑张惠展

【机构】

：

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

：

食品与药品

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

：

CECROPIN P1 融合表达 Ni—NTA亲和层析肠激酶抑菌活性 cecropin P1 fusion expression Ni-NTA affini

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目的在大肠杆菌中融合表达抗菌肽cecropin P1。方法根据抗菌肽cecropin P1的氨基酸序列，依照大肠杆菌密码子的偏爱性，采用SOE技术合成cecropin P1的编码基因；将其克隆至表达载体pET-32a（＋）上，经IPTG诱导表达，超声上清液用Ni-NTA亲和层析初步纯化，经肠激酶切割后，用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法初步测定重组cecropin P1的活性。结果构建得表达质粒pET32-P1，经IPTG诱导表达获得融合蛋白TrxA-cecropin P1，占总蛋白质25％以上；纯化产物经肠激酶

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