【摘 要】
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该实验拟明确黄芪甲苷对心血管疾病最主要的致病因素血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用，以及在该过程中钙离子(Ca2+)/phosphatidylinositol-3-kinase（PI3K）/protein kinase B（Akt）/血管内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）
【机 构】
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河南中医药大学第一附属医院中心实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（82074194）；
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该实验拟明确黄芪甲苷对心血管疾病最主要的致病因素血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用，以及在该过程中钙离子(Ca2+)/phosphatidylinositol-3-kinase（PI3K）/protein kinase B（Akt）/血管内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）/一氧化氮（nitric oxide, NO）信号通路的作用。通过人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）培养模型，利用ELISA、cell-based ELISA,Western blot及单核细胞黏附实验等方法，明确黄芪甲苷对AngⅡ所诱发的炎症反应的抑制作用及相关机制。实验结果显示，黄芪甲苷明显增加HUVECs产生和释放NO,呈剂量和时间依赖性，并伴有eNOS蛋白的磷酸化（P＜0.05）,黄芪甲苷所诱发的上述变化被特异性的一氧化氮合酶阻断剂NG-monomethyl-L-arginine（L-NMMA）、PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002或钙离子螯合剂ethylene glycol tetraacetic acid（EGTA）所阻断（P＜0.05）。与正常对照组相比，AngⅡ明显增加HUVECs产生和释放肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、单核细胞趋化蛋白-1和黏附因子（细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1）,以及单核细胞黏附于血管内皮细胞的数量，并同时伴有磷酸化的核转录因子-κB抑制性因子α含量的增加及核转录因子-κB活性的升高（P＜0.05）。针对AngⅡ所诱发的炎症反应，黄芪甲苷具有明显的抑制作用（P＜0.05）,而黄芪甲苷所诱发的抑制作用为L-NMMA、LY294002或EGTA所阻断（P＜0.05）。因此，该实验结果表明黄芪甲苷通过激活Ca2+/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路抑制AngⅡ所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应。
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