【摘 要】
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目的 检测鼻咽癌CNE-2细胞中Survivin表达变化与信号通路PTEN/PI3K/AKT的表达差异,探讨对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖和凋亡产生的影响.方法 设计特异性siRNA转染CNE-2细胞,抑制细
【机 构】
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海南大学热带农林学院 海南海口570228海南省人民医院医学检验中心、海南省细胞与分子遗传转化医学重点实验室 海南海口570311;
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目的 检测鼻咽癌CNE-2细胞中Survivin表达变化与信号通路PTEN/PI3K/AKT的表达差异,探讨对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖和凋亡产生的影响.方法 设计特异性siRNA转染CNE-2细胞,抑制细胞内Survivin表达;构建过表达质粒转染CNE-2细胞,促进细胞内Survivin表达;以CCK8法检测各组中不同时间CNE-2细胞活性;RT-PCR法检测CNE-2细胞中Survivin、PI3K、PTEN、AKT的mRNA表达.蛋白免疫印迹法检测CNE-2细胞中Survivin、PI3K、PTEN、AKT、p-AKT各相关蛋白表达情况.结果 (1)CCK8:利用CCK8检测细胞活性,与空白对照组相比,Survivin抑制组活性降低;Survivin过表达组活性增加.(2)RT-PCR结果显示:Survivin抑制组Survivin mRNA表达抑制率为(41.9±6.9)％(P＜0.01),PI3K mRNA表达抑制率为(43.3±7.2)％(P＜0.01),AKT mRNA表达抑制率为(38.7±4.1)％(P＜0.01),PTENmRNA表达抑制率无统计学意义;Survivin过表达组Survivin mRNA过表达率为(203.8±17.1)％ (P＜0.01),AKT mRNA过表达率为(239.0±34.2)％(P＜0.01),PTEN、PI3K mRNA表达率无统计学意义.(3)Westernblot结果:Survivin抑制组与阴性对照组相比,PTEN、p-AKT蛋白表达量无明显差异,Survivin、PIK3、AKT蛋白表达量显著下调.Survivin过表达组与阴性对照组相比,PTEN、PIK3、p-AKT蛋白表达量无明显差异,Survivin、AKT蛋白表达量显著上调.结论 在鼻咽癌CNE-2细胞中,Survivin调控AKT,与AKT呈正相关.Survivin抑制时,能有效抑制CNE-2细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡;Survivin过表达时,能有效促进CNE-2细胞增殖,抑制其发生凋亡.对细胞的增殖及凋亡起正协同作用.
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