目的基于多重PCR和反向斑点杂交原理,建立快速检测乙肝病毒(HBV)基因型和耐药性的膜芯片方法,并对其临床应用价值进行探讨。方法根据HBV基因序列设计探针并制作膜芯片,用PCR-反向斑点杂交检测3种HBV标准菌株和38例HBV临床分离株的基因型和耐药性,检测结果与测序结果进行比较,分析方法的准确性和最低检出限。对深圳地区187例HBV阳性标本进行基因分型和耐药性检测,了解其临床应用价值。结果 38例HBV临床分离株和3株HBV标准株鉴定结果与测序法完全一致,3株非HBV病毒和11株非HBV标准菌株无阳性显色,该方法准确性达到100%,最低检出限为103 copies/ml。深圳地区187例HBV临床分离株以B型为主,占57.8%,C型占37.4%,未测出D型。187例HBV临床分离株的耐药突变率为26.2%,以rt L180M+rt M204V/I为主,占67.3%,其次为rt M204I,占16.3%。临床HBV耐药株以C型为主,占65.3%,B型占34.7%。结论用膜芯片检测HBV基因型与耐药性具有简便、快速、准确性及特异性高的优点,评价指标符合临床实验要求,可在临床推广使用。