从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skynet0079
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为建立从江香猪(Sus scrofa)脂肪前体细胞的体外培养模式,分析从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达差异。采集5日龄从江香猪背最长肌和皮下脂肪组织,利用胶原酶消化法,分别从此两种组织中分离获得脂肪前体细胞。经诱导分化后,采用q RT-PCR技术检测细胞分化过程中脂肪合成与分解基因:转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、甘油三酯水解酶(adipose triacylglycerol lipase,ATGL)、激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase,HSL)的时序表达情况。成功构建从江香猪脂肪前体细胞的体外培养模式。通过q RT-PCR分析显示,在肌内脂肪前体细胞中,PPARγ、FAS、ACC m RNA表达水平在整个分化早期72 h时均呈现较高表达,显著高于0 h的表达水平(P<0.05);LPL m RNA表达水平在分化早期各阶段无明显差异(P>0.05),但在144 h时出现显著的大幅度上调,极显著高于其他各阶段表达水平(P<0.01);ATGL、HSL m RNA表达水平在整个分化阶段均呈现"升高-降低-升高"的表达规律。在皮下脂肪前体细胞中,PPARγ基因在诱导分化72 h的表达水平最高,极显著高于其他几个阶段的表达水平(P<0.01);LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL m RNA表达水平在整个分化早期48和72 h均呈现较高表达,极显著高于0 h的表达水平(P<0.01),之后均下降。在离体培养条件下,各脂肪细胞分化相关基因在肌内脂肪前体细胞的分化后期,表现较活跃;而各脂肪细胞分化相关基因在皮下脂肪前体细胞的分化早期,表现较活跃。研究结果表明从江香猪皮下脂肪的形成可能远远早于肌内脂肪,对进一步研究从江香猪脂肪沉积机制具有重要意义。
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