【摘 要】
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为确定超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶（TSA）中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系,以含TSA基因的pEt-28a-His6质粒为模板,利用定点突变技术,将第186位点的天
【机 构】
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淮海工学院海洋学院,大连海洋大学食品工程学院
【基金项目】
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江苏省高校自然科学研究重大项目（09KJAl70001）,江苏省科技支撑计划项目（BE2008340）,江苏省高校自然科学基础研究项目（08KJB550001）
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为确定超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶（TSA）中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系,以含TSA基因的pEt-28a-His6质粒为模板,利用定点突变技术,将第186位点的天冬氨酸（Asp）突变为天冬酰胺（Asn）,突变子转化至E.coli BL21（DE3）并经IPTG诱导表达,测定突变前后的酶活性,定点突变后的TSA无酶活性;采用DNAStar和Deepview蛋白分析软件,预测突变前后TSA蛋白的二级结构和三级结构,结果表明Thermococcus sicul
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