目的建立适合视网膜血管的消化方法,探讨一种稳定可重复的视网膜血管消化铺片技术。方法一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,另设正常组,36周后取材固定,分别采用胶原酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法三种方法消化视网膜血管,观察并对比三种方法制作的铺片效果;对铺片进行形态学观察,并比较正常组与模型组毛细血管面积密度及内皮细胞/周细胞数比值的变化。结果胶原酶消化程度不足以显示出视网膜血管结构;胰蛋白酶消化法残存较多的神经胶质细胞及其他组织细胞,不能完全显示视网膜血管网;胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法能完整显示出视网膜血管网,形态结构清晰,可以观察血管的面积分布、管径变化及管壁细胞结构。与正常组相比,模型组视网膜毛细血管排列紊乱,毛细血管面积密度显著升高(P<0.01);内皮细胞增生,周细胞减少,内皮细胞数与周细胞数比值升高(P<0.01)。结论胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法是最适合视网膜血管的消化方法,结合良好规范的操作技巧可以稳定的重复视网膜血管消化铺片技术。