【摘 要】
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[目的]纳米银在医药、化妆品领域有些广泛的应用.这些应用使得纳米银直接与人体接触,增加了纳米银进入人体、组织以及细胞的几率.体内研究结果表明纳米银可以透过血脑屏
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院化学品安全研究所,北京,100176
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]纳米银在医药、化妆品领域有些广泛的应用.这些应用使得纳米银直接与人体接触,增加了纳米银进入人体、组织以及细胞的几率.体内研究结果表明纳米银可以透过血脑屏障进入脑部组织.本文研究纳米银对大鼠原代星形胶质细胞的毒性,并通过相关蛋白的变化,寻找纳米银引起细胞凋亡的机制.[材料和方法]纳米银购自上海沪正公司,颗粒粒径20±5nm.通过检测Caspase酶的活性,以及流式细胞仪的方法测定纳米银对大鼠原代星形胶质细胞凋亡的影响,并通过WesternBlot的方法测定MAPK通路相关蛋白的表达情况.[结果]通过测定细胞存活率,发现10μg/mL以上的纳米银会引起大鼠原代星形胶质细胞的显著毒性效应,但是细胞培养液中的LDH水平并没有显著增加,说明细胞膜没有破损.对caspase活性进行检测,发现10μg/mL纳米银暴露的细胞caspase的活性与阴性对照相比有显著性增加,说明10μg/mL纳米银可以诱导细胞发生凋亡.同样,利用Annexin V与PI染色并通过流式细胞仪检测发现显示,纳米银(10μg/mL)暴露24h,细胞早期凋亡率达到40%.检测蛋白的表达水平,发现纳米银引起凋亡相关蛋白ERK、AKT、NGF、JNK的磷酸化水平升高,并且存在剂量相关性.[结论]纳米银粉对大鼠原代星形胶质细胞具有显著毒性作用,可造成细胞显著的凋亡.纳米银引起大鼠原代星形胶质细胞凋亡的过程是通过激活MAPK和JNK通路调节的.
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