【摘 要】
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提取已鉴定的A型魏氏梭菌贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收2~4Kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coliJM109,通过Amp抗药性和显色反应的选择,再提取阳性
【机 构】
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贵州大学动物科学学院动物医学系(贵州贵阳)
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
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提取已鉴定的A型魏氏梭菌贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收2~4Kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coliJM109,通过Amp抗药性和显色反应的选择,再提取阳性重组细菌质粒进行探针检测、酶切分析和PCR鉴定,筛选出含魏氏梭菌α-毒素基因的重组大肠杆菌;经溶血与溶血抑制试验及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实,重组E.coli的表达产物符合α-毒素的生物学特性.
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