[目的]针对谷物中霉菌毒素污染往往是多种霉菌毒素同时产生和存在的特点,建立不同种类多种霉菌毒素的同步检测方法.[材料和方法]本研究提供了一种新的样品前处理策略,根据不同种类霉菌毒素化学性质分为两类,采用杂质吸附原理对样品提取溶液进行净化,采用稀释上样方式进一步降低基质效应和溶剂效应,配合高效液相色谱串联质谱仪进行测定,从而实现了一种提取溶液,两种净化处理,同一液相分离条件,多反应监测离子模式,对谷物中40种霉菌毒素的快速、低成本定性定量检测.[结果]方法线性范围在1～1000μg/kg之间,方法的定量限为0.5～100 μg/kg,高、中、低三种添加浓度水平下,40种霉菌毒素的平均回收率绝大部分为70％～120％(个别为30％～50％),相对标准偏差小于25％.[结论]应用该方法对来源于全国200多批次玉米、小麦及其副产物样品进行检测,发现镰刀菌属毒素污染水平和范围均较高,而且2种及以上霉菌毒素同步污染的比例高达95％以上；曲霉属、青霉属和麦角类毒素污染率较低.