【摘 要】
：
目的：甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH),又称“冰毒”,因其合成简单,成本低,易成瘾,已成为我国毒品滥用中的“头号毒品”.METH 可诱导神经元发生变性,坏死,神经系统的永久性损害.前期基因芯片表达谱发现Lipocalin-2(LCN2)在METH处理PC12 细胞中表达上调.LCN2 属于Lipocalin 家族一员,可调节细胞死亡与增殖并在多种神经系统退行性病中发挥重要作用
【机 构】
：
南方医科大学法医学院,广东广州510515
【出 处】
：
中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
论文部分内容阅读
目的：甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH),又称“冰毒”,因其合成简单,成本低,易成瘾,已成为我国毒品滥用中的“头号毒品”.METH 可诱导神经元发生变性,坏死,神经系统的永久性损害.前期基因芯片表达谱发现Lipocalin-2(LCN2)在METH处理PC12 细胞中表达上调.LCN2 属于Lipocalin 家族一员,可调节细胞死亡与增殖并在多种神经系统退行性病中发挥重要作用.然而LCN2 表达差异是否参与甲基苯丙胺诱导的神经毒性作用尚不清楚.本课题拟探究LCN2 在METH 诱导的神经毒性中的作用及METH 诱导LCN2 表达的机制,旨在为METH 诱导的神经毒性损伤的防治提供新的靶点及理论依据.方法：选择SD 成年雄性大鼠,SD 大鼠星形胶质细胞原代细胞和神经元原代细胞为实验对象,建立METH 染毒动物及细胞模型.通过Western blot、免疫荧光、RT-qPCR、ELISA 等技术,检测LCN2,LCN2R、凋亡相关蛋白、内质网应激相关蛋白表达,建立原代星胶细胞与神经元之间共培养模型,利用RNAi,Western blot、流式细胞术,TUNEL染色,检测干预前后LCN2、LCN2R 及凋亡相关蛋白的表达情况.利用内质网特异抑制剂,检测干预前后内质网应激相关蛋白的表达情况及LCN2 的表达.结果：1.METH 染毒的细胞和动物模型中星形胶质细胞的LCN2 高表达,未见神经元表达.LCN2 作为一种分泌蛋白,在动物脑脊液和血清以及原代培养的星形胶质细胞的上清液中均可见其表达升高；2.星形胶质细胞和神经元共培养METH 染毒模型中,星胶释放的LCN2 可与神经元表面的LCN2 受体LCN2R 相结合介导神经元死亡.3.METH处理神经元后与正常星形胶质细胞共培养,可显著激活星形胶质细胞,促进星胶合成和释放LCN2；4.METH 通过ROS-PERK-eIF2 星通路诱导星形胶质细胞的激活及调节LCN2 合成与释放.结论：METH 通过ROS-PERK-eIF2 及通路介导星形胶质细胞来源的LCN2 的合成与释放；LCN2 与神经元表面受体LCN2R 相结合诱导神经元凋亡,从而介导METH 的毒理作用.
其他文献
目的：评估重金属暴露与结直肠癌遗传风险之间的关系,研究环境因素与遗传因素对结直肠癌发生发展的影响.方法：采用电感耦合等离子体质谱法(Inductively coupled plasma mass spectrometer,ICP-MS)检测结直肠患者与正常对照人群血浆中56 种重金属的水平.采用主成分分析(Principal component analysis,PCA),正交偏最小二乘-判别分析
背景机体肿瘤在发生发展过程中,面临多种不利环境压力可引起细胞生理进程失调,会诱发内质网应激(ER stress)和未折叠蛋白反应(UPR)活化,可以促进或抑制癌症进展,但其机制目前尚无定论。近年来,大量研究已揭示LncRNA 在癌症中存在异常表达现象,可作为癌基因或抑癌基因影响癌症发生发展的进程,但目前其在内质网应激中的作用还不清楚。目的 探讨LncRNA-ERSR 在皮肤鳞癌中调控内质网应激从而
目的：环状RNA在食管癌的发生发展中具有重要的调控作用,由于其稳定闭合环状结构而可能成为潜在早期诊断和治疗的生物标志物.本研究通过干预人正常食管上皮Het-1A细胞中hsa_circ_0063865的表达,探索该环状RNA在食管上皮细胞恶性转化过程中的影响,以期为深入研究环状RNA在食管癌发生发展中的作用及早期生物标志物的筛选提供相关参考.方法：将hsa_circ_0063865过表达和低表达慢病
目的：在氢醌诱导TK6 恶性转化细胞和苯暴露工人中,揭示DNMT1 在激活lncRNA UCA1 表达过程的DNA 甲基化机制.方法：以正常的TK6 淋巴母细胞和氢醌诱导TK6 恶性转化细胞、苯暴露工人作为研究对象,反转录实时荧光定量PCR 检测UCA1 的表达；CRISPR/CAS9 双载体慢病毒转染系统构建DNMT1、DNMT3b 敲除细胞；蛋白质免疫印迹检测蛋白表达；甲基化特性PCR(MSP
目的：双酚A 是一种人工合成的类雌激素化工原料,用于聚碳酸酯、环氧树脂等日用品的生产,我们前期研究发现低剂量双酚A 可促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭及EMT(上皮间质转化),但机制未明.本研究拟探讨低剂量双酚A 通过其响应的lncRNA 促进卵巢癌进展的精细分子机制.材料与方法：研究利用CCK-8 法检测卵巢癌细胞的增殖；运用划痕实验、Transwell 侵袭实验检测卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的变化；采
目的 筛选DMF(N,N-二甲基甲酰胺)诱导肝细胞凋亡过程中差异表达的关键miRNA 分子,并阐明其作用机制,为DMF 职业中毒的诊断和治疗提供理论参考.方法 HL-7702 细胞,随机分为0,18.75,37.5,75,150mM 浓度DMF 剂量组进行48h 染毒.流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测caspase 3 蛋白的表达水平.提取0、75、150mM DMF 剂量组的细胞总R
目的 三氯乙烯(TCE)是一种应用广泛的工业溶剂,也是一种广泛存在的环境污染物,其暴露会导致严重的肝损伤.我们前期研究表明,SET 是TCE 致肝细胞毒性中的关键蛋白,且miR-199b-5p 靶向调控SET.然而,SET 相关的精确调控机制仍不清楚.方法 通过双荧光素酶报告基因法验证miR-199b-5p 对SET 具有直接调控作用；此外利用重组质粒与慢病毒载体分别构建miR-199b-5p 稳
目的 本研究采用C57BL/6 小鼠为动物模型,旨在研究山楂提取物(Hawthorn fruitextract,HFE)在微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)诱导的C57BL/6 小鼠肝脏毒性中的保护作用.方法 12 只8 周龄SPF 级C57BL/6 雄性小鼠随机分为四组,每组4只,分别为：对照组、HFE 组(120 mg/kg)、MC-LR 染毒组(20 μg/kg)、
目的 探讨NNK 暴露对人支气管上皮细胞16HBE 的增殖影响,以及环状RNA 在其中的调控作用.方法 采用不同浓度的NNK(0μM,50μM,100μM,200μM,300μM)对16HBE 细胞进行48h 染毒.通过CCK-8 和EdU 实验检测每组细胞的增殖活性,经流式细胞术分析每组细胞的周期分布情况,通过生物信息学预测细胞增殖调控相关的circRNA,经qRT-PCR 验证并挑选NNK 暴
目的：1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)是一种普遍存在的环境污染物,广泛存在于环境的空气、地下水以及饮用水中.过量的高浓度接触1,2-DCE 会导致动物和人类的中毒性脑水肿.已有研究发现1,2-DCE 可以诱导小脑、肝脏和睾丸细胞凋亡,提示1,2-DCE除了可致脑水肿,也可能通过诱导神经细胞凋亡介导其神经毒性.方法：40 只NIH 雄性小鼠连续28 天通过全身动式吸入1,2-DCE(0、100、3