【摘 要】
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目的 探讨miR23 b-3p和miR125b-5p对HepG2细胞中载脂蛋白(a)[Apo(a)]表达的影响及其作用机制。方法 以HepG2细胞为研究对象,Ets1 siRNA通过Lipo 2000转染HepG2细胞,Weste
【机 构】
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南华大学心血管疾病研究所 动脉硬化湖南省重点实验室,湖南省衡阳市421001
【出 处】
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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议
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目的 探讨miR23 b-3p和miR125b-5p对HepG2细胞中载脂蛋白(a)[Apo(a)]表达的影响及其作用机制。方法 以HepG2细胞为研究对象,Ets1 siRNA通过Lipo 2000转染HepG2细胞,Western blot检测细胞内Ets1及Apo(a)蛋白水平；通过Lipo 2000分别将miR23b-3p mimic和miR125b-5p mimic转染HepG2细胞,48 h后real-time PCR分别验证细胞内miR23b-3p和miR125b-5p水平,Western blot检测细胞Apo (a)蛋白水平、Ets1蛋白水平,RT-PCR检测Apo(a) mRNA水平、ELISA测定培养基中Apo(a)浓度,免疫细胞化学进一步分析细胞内Ets1水平；双荧光素酶报道基因分析miR23b-3p和miR125h-5p的作用靶点。结果 Ets1 siRNA明显降低细胞内Ets1及Apo(a)水平。与对照组相比,miR23b-3p和miR125b-5p可显著下调HepG2细胞内Ets1及Apo(a)水平；miR23 b-3p抑制剂和miR125b-5p抑制剂可显著上调HepG2细胞内Ets1及Apo(a)水平。靶基因验证实验证实了Ets1为miR23b-3p和miR125b-5p共有的靶基因。结论 miR23b-3p和miR125b-5p通过作用于靶基因Ets1下调HepG2细胞Apo(a)水平。
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