【摘 要】
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目的:探讨自噬在炎症刺激下成牙本质细胞中的作用及其作用机制.方法:1ug/ml脂多糖分别处理mDPC6T(前成牙本质细胞系)6h,12h,24h,CCK8试剂盒检测细胞存活,免疫印迹和免疫荧
【机 构】
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武汉大学口腔医院,口腔生物学教育部重点实验室
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目的:探讨自噬在炎症刺激下成牙本质细胞中的作用及其作用机制.方法:1ug/ml脂多糖分别处理mDPC6T(前成牙本质细胞系)6h,12h,24h,CCK8试剂盒检测细胞存活,免疫印迹和免疫荧光检测自噬指标LC3,Beclin1等的表达.自噬抑制剂氯喹阻断自噬流,随后分别使用Akt/mTOR信号通路和survivin的抑制剂LY294002和Ym155来研究自噬的作用机制.免疫组化进一步检测自噬指标和survivin在根尖周病损(根尖周囊肿和肉芽肿)中的表达.结果:在温和剂量的脂多糖刺激下,mDPC6T细胞的存活能力未受到显著影响,在这个过程中自噬指标的表达先增强后降低.LC3免疫荧光结果显示自噬在脂多糖刺激下增强.氯喹阻断自噬后导致细胞存活能力在早期阶段6h下调,而在晚期阶段12h细胞存活能力上调.免疫印迹结果表明p-Akt和survivin在早期阶段6h前未被激活,随后逐渐被激活且在晚期12h达到峰值.在根尖周病损中检测到自噬指标LC3及survivin的表达.结论:自噬在炎症刺激下的成牙本质细胞中具有双向作用.在炎症早期自噬增强,对细胞在炎症中的存活可能具有保护作用;在晚期通过Akt/mTOR/survivin信号通路的激活下调自噬,可能与细胞死亡有关.
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