【摘 要】
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivlenol,DON)又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物
【机 构】
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中国农业大学,北京市海淀区圆明园西路2号,100094
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivlenol,DON)又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物及其制品中,在全球范围内污染发生率较高,拒报道,我国抽查的样品中,DON的检出率为95.8％,超标率达17.7％.因此,建立快速筛选的免疫学分析方法,十分必要,抗原-抗体反应是免疫分析方法的基础,而目前我国关于DON抗体的制备文献报道较少,抗体灵敏度较低,不足以满足快速筛选分析方法检测的要求.因此本研究旨在报道一种高灵敏度的DON单克隆抗体的制备方法,为DON的快速免疫学分析方法的建立提供原料.为此,经过对DON位点的改造,合成了4种免疫原,分别是3-HS-DON-KLH,CDI-DON-KLH,HS-DON-KLH和8-CMO-DON-KLH,每个免疫原免疫6只SPF雌性Balb/c小鼠,经过动物免疫、检测和细胞融合筛选亚克隆,最终在3-HS-DON-KLH-2小鼠获得了一株单克隆抗体,细胞株编号为12E8,该细胞株能分泌针对游离DON特异性的抗体,选取3-HS-DON-BSA作为包被原,采用间接竞争ELISA方法建立了标准曲线,它针对DON,3-AC-DON,15-AC-DON的IC50值分别是5.73ng/mL,0.25ng/mL,66.32ng/mL,与其它真菌毒素结构类似物,如T-2毒素、玉米赤霉烯酮、雪腐镰刀菌烯醇等几乎没有交叉反应,是目前文献报道较为灵敏的抗体.DON特异性抗体的获得,为DON快速免疫学筛选分析方法的建立打下了基础.
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