【摘 要】
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肝表达抗菌肽2(1iver-expressed antimicrobialpeptide-2,LEAP-2)是一种重要的阳离子抗菌肽,在宿主先天免疫中扮演着重要的角色,然而LEAP-2是如何调控宿主免疫系统抵御病原入
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肝表达抗菌肽2(1iver-expressed antimicrobialpeptide-2,LEAP-2)是一种重要的阳离子抗菌肽,在宿主先天免疫中扮演着重要的角色,然而LEAP-2是如何调控宿主免疫系统抵御病原入侵的机制还未被充分了解。在本研究中,我们克隆了大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)LEAP-2基因,并对其序列进行分析,发现大弹涂鱼LEAP-2属于鱼类LEAP-2A一支且与香鱼LEAP-2最为接近。接着我们检测了大弹涂鱼LEAP-2在健康组织中的表达分布,发现大弹涂鱼LEAP-2在肝脏中的表达量最高。在迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染后,大弹涂鱼LEAP-2在肝、肾、脾和腮中表达量都显著上调,仅在肠中表达下调。随后我们化学合成了LEAP-2成熟肽,发现LEAP-2成熟肽在体外并不能抑制迟缓爱德华氏菌。但是腹腔注射1.0μg/g LEAP-2或者10.0μg/g LEAP-2可以显著提高迟缓爱德华氏菌感染大弹涂鱼的存活率以及降低染病大弹涂鱼的组织载菌量,同时显著下调由于迟缓爱德华氏菌感染所引起的免疫组织中TNF-α和IL-1β表达。最后我们用大弹涂鱼LEAP-2成熟肽处理单核/巨噬细胞,发现1.0μg/ml LEAP-2或者10.0μg/ml LEAP-2可以趋化单核/巨噬细胞,提高单核/巨噬细胞的呼吸爆发能力以及调控单核/巨噬细胞炎症因子的表达,在10.0μg/ml浓度的作用下,大弹涂鱼LEAP-2也能提高单核/巨噬细胞的杀菌能力。然而LEAP-2对单核/巨噬细胞的吞噬能力并没有影响。我们的研究首次证明了LEAP-2可以调控免疫细胞,并且可通过调控免疫系统抵御病原感染,而不依赖于其直接的杀菌功能。
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