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目的:1.建立可行的HPLC-MS/MS法,同时测定Beagle犬血浆中右旋雷贝拉唑、左旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、左旋去甲基雷贝拉唑和砜基雷贝拉唑的浓度。2.建立可行的HPLC-MS法,测定Beagle犬血浆中硫醚雷贝拉唑的浓度。3.研究注射用右旋雷贝拉唑钠及其代谢物在Beagle犬体内的毒代动力学,阐述毒性试验条件下的药物暴露量与剂量和时间的关系。方法:1.HPLC-MS/MS法同时测定右旋雷贝拉唑、左旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、左旋去甲基雷贝拉唑和砜基雷贝拉唑。血样用乙酸乙酯提取处理,CHIRAL-AGP手性柱(150X4mm,5 μm)分离;流动相为乙腈:10mM乙酸铵溶液,流速为0.5 mL·min-1,梯度洗脱;柱温25 ℃。质谱用ESI离子源,正离子检测模式;毛细管电压4000 V;干燥气(N2)流速11.0 L·min-1;干燥气压力45 psi;干燥气温度为350 ℃;MRM检测模式,360.3→242.1(左、右旋雷贝拉唑),376.2-→240.1(砜基雷贝拉唑),346.2-→228.2(左、右旋去甲基雷贝拉唑),368.2-→190.2(奥美拉唑),碎片电压分别为110V、135 V、100V和150V,碰撞能分别为10eV、22eV、7eV和10eV。2.HPLC-MS法测定硫醚雷贝拉唑。血样用乙腈沉淀蛋白处理,Inertsil(?)ODS-3色谱柱(4.6×150 mm,5μm)分离;流动相为乙腈:5 mM乙酸铵溶液=65:35(V/V),流速0.7mL·min-1;柱温25 ℃。质谱用ESI离子源,正离子检测模式;毛细管电压4000 V,干燥气(N2)流速11.0 L·min-1,干燥气温度350 ℃,雾化气压力50 psi;选择性监测质荷比(m/z)为344.2(硫醚雷贝拉唑)和285.1(内标地西泮)的离子峰,碎片电压分别为50 V和90 V。3.40只Beagle犬随机分为四组,低、中、高三个剂量组按2.5、10、40 mg.kg-1的剂量给予注射用右旋雷贝拉唑钠,对照组按40 mg.kg-1的剂量给予注射用雷贝拉唑钠,于给药首日和给药第30日收集血浆样本,置于-80 ℃冷冻保存待测。采用建立的HPLC-MS/MS法和HPLC-MS法检测血浆中左旋雷贝拉唑、右旋雷贝拉唑、左旋去甲基雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、砜基雷贝拉唑和硫醚雷贝拉唑的浓度,采用DAS 2.1.1软件分别计算各成分主要药代动力学参数t1/2、AUC（0-t)、AUC(0-∞)(统计矩参数),Cmax和Tmax采用实测值,用SPASS17.0软件考察单次和多次给药是否有差异,并分析药物暴露量与剂量和时间的关系。结果:1.右旋雷贝拉唑、左旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、左旋去甲基雷贝拉唑、砜基雷贝拉唑和内标奥美拉唑的基质效应以及回收率满足测定要求,血浆中的基质对各成分测定无干扰;左旋、右旋雷贝拉唑在10～25000ng·mL-1范围内线性良好,左旋、右旋去甲基雷贝拉唑在5～1000 ng·mL-1范围内线性良好,砜基雷贝拉唑在10～1000 ng·mL-1范围内线性良好;左旋、右旋雷贝拉唑和砜基雷贝拉唑的定量下限为5 ng·mL-1,左旋、右旋去甲基雷贝拉唑的定量下限为10 ng·mL-1;批内、批间RSD均小于15%;血浆样本经过提取后室温放置15h以及经反复冻融(两次)和长期冷冻放置60天后稳定。2.硫醚雷贝拉唑和内标地西泮的基质效应和回收率满足测定要求,血浆中的基质对硫醚雷贝拉唑测定无干扰;硫醚雷贝拉唑在2～800 ng·mL-1范围内线性良好,定量下限为2 ng.L-1;批内、批间RSD均小于15%;血浆样本经过提取后室温放置12 h以及经反复冻融(两次)和-80 ℃冷冻放置65天后稳定。3.单次给药和多次给药后,右旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、砜基雷贝拉唑和硫醚雷贝拉唑的暴露量基本随剂量升高而升高。结论:1.本文建立的HPLC-MS/MS法和HPLC-MS法灵敏、准确、简便,适用于Beagle犬血浆中右旋雷贝拉唑、左旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、左旋去甲基雷贝拉唑、砜基雷贝拉唑和硫醚雷贝拉唑浓度的测定。2.右旋雷贝拉唑钠注射用药后,右旋雷贝拉唑、右旋去甲基雷贝拉唑、砜基雷贝拉唑和硫醚雷贝拉唑的Cmax和体内暴露量(AUC)与给药剂量呈正相关,但无线性相关性。多次给药与单次给药相比,硫醚雷贝拉唑暴露量明显增加且清除率降低(P<0.01)。