基于斑马鱼活体模型的氟唑菌酰胺生物毒性及机制研究

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氟唑菌酰胺(fluxapyroxad,FLU)是一种琥珀酸脱氢酶抑制剂类(succina te dehydrogenase inhibitor,SDHI)杀菌剂,主要用于防治广谱真菌病害。然而,FLU暴露会引起水生生物出现明显的致死和致畸现象。目前已有研究报道了FLU对多种水生生物的半致死浓度,而FLU对于水生生物的毒性作用以及毒性机制的研究却相对较少。斑马鱼近年来已成为农药生态风险评估的理想实验模型。本研究选用斑马鱼为研究对象,考察FLU对斑马鱼的毒性效应。实验结果表明:1、将斑马鱼胚胎暴露于FLU(0μM、0.03μM、0.3μM和3μM)中,在96 hpf,3μM FLU暴露的斑马鱼幼鱼出现了凋亡过度引发的小眼症状。与对照组相比,斑马鱼幼鱼视网膜的神经节细胞层和内核细胞层的标记基因(alcam a、atoh7、vsx1、prox1a和sox2)的表达紊乱,外核层标记基因(opn1sw1、op n1lw1、opn1mw1、opn1sw2和rho)的表达明显降低。2、高浓度3μM FLU暴露后,斑马鱼胚胎在24 hpf出现红细胞发生异常。与对照组相比,斑马鱼胚胎红细胞的数量明显减少,同时红细胞标记基因(gat a1a、hbbe1和hbbe2)的表达量明显降低,而髓系细胞的标记基因(spi1b、lcp1、mpeg1.1和mpx)的表达量无明显变化,且对应血细胞类型的苏丹黑染色及中性红染色结果也无明显变化。3、高浓度3μM FLU暴露后,斑马鱼胚胎在96 hpf后出现鱼鳔充气障碍,同时伴随着斑马鱼幼鱼鱼鳔组织层的标记基因anxa5b和elovl1a的表达量明显减少。4、将斑马鱼成鱼暴露于FLU(0μM、0.005μM和0.05μM)中,在120天后,斑马鱼成鱼的肝脏、肠道和心脏组织结构出现异常,并且会引起子代发育畸形。5、采用高级氧化手段对FLU暴露液进行脱毒处理,综合各项数据,臭氧紫外氧化催化后的FLU脱F率,前体物去除率等数据都较好,并且可以显著减轻FLU暴露引起的斑马鱼胚胎畸形。综上所述,FLU暴露会干扰斑马鱼的眼睛、鱼鳔和红细胞正常发育过程,且低浓度FLU对成鱼内脏及子代也具有一定毒性作用,臭氧紫外催化可在一定程度上降低FLU对水生生物毒性。我们的结果将为评价FLU对水生生态系统的潜在影响及毒性机制提供更为全面的参考。
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