【摘 要】
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目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌Hela细胞放射增敏的效应，探讨其对官颈癌放射增敏作用的机制，为As2O3作为官颈癌的放射增敏剂应用于临床提供实验依据。方法：MTT法测定人宫颈癌Hela细胞对As2O3药物的敏感性，计算细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100％，实验重复三遍，取平均值，结果以药物浓度为横坐标、以细胞抑制率为纵坐标，通过Excel软件绘制细胞生长抑制曲
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目的：
观察三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌Hela细胞放射增敏的效应，探讨其对官颈癌放射增敏作用的机制，为As2O3作为官颈癌的放射增敏剂应用于临床提供实验依据。
方法：
MTT法测定人宫颈癌Hela细胞对As2O3药物的敏感性，计算细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100％，实验重复三遍，取平均值，结果以药物浓度为横坐标、以细胞抑制率为纵坐标，通过Excel软件绘制细胞生长抑制曲线，通过ID50计算软件计算出药物作用48h后的半数致死剂量(ID50)。
集落形成法观察20％ID50的As2O3对Hela细胞的放射增敏作用，计数含50个细胞以上的集落数，求出细胞存活分数(细胞存活率)，细胞存活率的计算方法为：处理组集落形成率/对照组集落形成率，实验重复三遍，取平均值，结果以放射剂量为横坐标、以细胞存活率为纵坐标，采用“多靶单击模型”通过SPSS13.0软件拟合细胞存活曲线，计算放射增敏比(SER)。
流式细胞仪测定细胞周期，分为空白对照组(空白组)、20％ID50的As2O3组(单药组)、单纯放射组(单放组)、放射+20％IDso的As2O3组(药放组)，每个组设3个平行样本，于25cm2的培养瓶中接种1×105个细胞。收集各组处理后的细胞进行固定、染色，流式细胞仪检测细胞周期的分布，用Multicycle软件进行分析。
免疫细胞化学法及western blotting法(按试剂盒说明书操作)检测空白组、单药组、单放组、药放组在药物作用后的p21Wafl/Cipl及Bcl-2两种蛋白表达变化情况。
结果：
1.As2O3对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用随药物浓度的增加而增强，48h时的半数致死剂量(ID50)值为10.86μmol/L。
2.As2O3对人宫颈癌Hela细胞有放射增敏作用，药放组的细胞存活率低于单放组，其平均致死剂量(Do)及准域剂量(Dq)均小于单放组(Do：2.49 Gy vs 3.45 Gy，Dq：1.03 Gy vs 1.89 Gy)，放射增敏比(SER)为1.39。
3.空白组、单药组、单放组、药放组在药物作用48h后G2/M期的细胞比例分别为12.45±1.88、18.91±1.65、18.42±2.29、31.07±6.66，统计分析表明单放及单药均能提高G2/M期的细胞比例(P<0.05，P=0.012，P=0.007)，放射及As203药物联合则G2/M期的细胞比例提高更显著(P<0.01，P=0.000)。
4.免疫细胞化学法及Western blot检测各组p21waf1/cip1及Bcl-2两种蛋白表达情况基本一致，结果表明可知放射及药物均能提高p21waf1/cip1的表达(P<0.05)，放射及As203药物联合则p21waf1/cip1表达更高(P<0.01)；放射及药物均能降低Bcl-2的表达(P<0.05)，放射及As2O3药物联合则Bcl-2表达更低(P<0.01)。
结论：
1.As203对人宫颈癌Hela细胞具有放射增敏作用.
2.As2O3对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用可能与其抑制Hela细胞的亚致死性损伤的修复、调整细胞周期的分布、上调p21waf1/cip1蛋白及下调Bcl-2蛋白的表达有关。
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