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目的研究秦皮乙素对小鼠肝癌Hepa1-6细胞体外细胞增殖的抑制作用,并建立Hepa1-6细胞小鼠皮下移植瘤模型,观察秦皮乙素对小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。探讨秦皮乙素对小鼠肝癌Hepa1-6细胞及Hepa1-6细胞小鼠皮下移植瘤生长抑制作用的相关机制。方法(1)采用MTT法检测在不同的处理时间下,不同浓度的秦皮乙素对Hepa1-6细胞体外增殖的影响;应用流式细胞仪检测不同浓度秦皮乙素对Hepa1-6细胞周期的影响;流式细胞术Annexin-v/IP双染法分析不同浓度的秦皮乙素对Hepa1-6细胞凋亡的影响。(2)将Hepa1-6细胞株于37℃,5%C02培养箱中培养。40只C57BL/6j小鼠右腋皮下接种Hepa1-6肿瘤细胞,建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组8只。分别为模型组(生理盐水)0.2ml·d-1,环磷酰胺(CTX)组100mg·kg·d-1,秦皮乙素高剂量组700mg·kg·d-1,秦皮乙素中剂量组400mg·kg·d-1,秦皮乙素低剂量组200mg·kg·d-1。于造模后第3天开始以后每天腹腔注射给药,每隔2天称量体重一次。第21天麻醉小鼠取出瘤组织。瘤组织称重并计算抑瘤率;RT-PCR检测凋亡基因Bax,Bcl-2mRNA的表达;Western blot检测Bax,Bcl-2,VEGF蛋白的表达。结果(1)秦皮乙素对Hepa1-6细胞体外增殖的作用:MTT法检测了5个梯度浓度的秦皮乙素对Hepa1-6细胞的增殖抑制作用,结果显示秦皮乙素在浓度为1.04mmol·L-1,2.08mmol·L-1,4.16mmol·L-1时对Hepa1-6细胞的增殖起到抑制作用;FCM检测结果显示随着秦皮乙素浓度的升高细胞凋亡率增高,秦皮乙素能够干扰细胞正常移动周期,阻滞细胞于S期。(2)秦皮乙素对小鼠皮下移植瘤的作用:实验第7天开始模型组小鼠体重下降,第11天CTX组小鼠体重下降,消瘦,毛色暗淡,活动力下降,至实验结束以上情况逐渐加重,秦皮乙素各组变化不明显;CTX组抑瘤率为65.03%,秦皮乙素高剂量组抑瘤率为55.42%,中剂量组抑瘤率为40.37%,低剂量组抑瘤率为20.33%,与模型组比较差异有统计学意义(P﹤0.01);RT-PCR检测秦皮乙素各组Bax mRNA的表达随秦皮乙素剂量的增高而增强,Bcl-2mRNA的表达随秦皮乙素剂量的升高而减弱,与模型组比较(P﹤0.05);Western blot检测秦皮乙素低﹑中﹑高各组Bax,VEGF蛋白表达逐渐升高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低,与模型组比较(P﹤0.05)。结论秦皮乙素对小鼠Hepa1-6细胞的增殖起到一定的抑制作用,干扰正常细胞周期并促进细胞凋亡;秦皮乙素对Hepa1-6细胞小鼠皮下移植瘤的生长起到抑制作用,其机制与上调Bax因子的蛋白,mRNA的表达,下调VEGF因子的蛋白,Bcl-2因子的蛋白与mRNA的表达有关。