重金属超富集相关基因ZNT1的克隆和转基因烟草的研究

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我们根据已发表的天蓝遏蓝菜(Thlaspi caerulescens)不同株系的ZNT1基因的序列,设计合成一对引物,为便于克隆和表达在引物两端分别加入XbaI、BamHI酶切位点.正向引物:5-AGTCTAGATGGCTTCATCTCCCACGAA-3(XbaI),反向引物:5-ATGGATCCTAAGCCCAAATGGC G/A AG-3(BamHI).然后以T.caerulescens的总DNA为模板进行PCR,扩增出约1200bp的DNA片段.将PCR产物经XbaI和BamHI双酶切后,克隆到经同样双酶切的pBS质粒载体上,命名为pBS-ZNT1.然后测序,结果表明其全长为1215bp,和国外报道的cDNA序列比较,同源性大于99.5%.
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