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基于抗原抗体特异性结合反应的免疫分析法具有灵敏度高、简单、快速、成本低、适合现场筛选等优点，被认为是当前最具有竞争性的微量检测技术。抗体作为免疫分析方法的核心材料，主要是抗原免疫动物获得。常规制备抗原的方法是将半抗原与载体蛋白偶联，由于半抗原设计合成仅引入了一个活泼基团，使其偶联到载体蛋白上的数目有限，导致制备的抗体往往会出现效价低；再者就是制备出的抗体不能对多个对象进行识别等。本文以我国农产品中残留问题突出的不同结构系的农药--对硫磷和氰戊菊酸(氰戊菊酯代谢物)为模型，利用树状分子连接多个半抗原的方法，制备了针对二者的单/双簇树状抗原，并采用酶联免疫法对获得的抗体进行鉴定和特性分析，主要研究结果如下： 1.非树状/树状半抗原及其抗原的设计合成根据对硫磷的化学结构特点设计合成两种不同手臂长度的非树状半抗原PA-Hapl和PA-Hap2；将氰戊菊酸(FA-Hapl)酰氯化和4-氨基丁酸反应合成了四个手臂长度的非树状半抗原(FA-Hap2)；采用固相合成的方法合成0～1-代对硫磷树状半抗原MAP2-PA-Hapl、MAP4-PA-Hapl及0～1-代氰戊菊酸树状半抗原MAP2-PA-Hapl、MAP4-PA-Hapl；将对硫磷和氰戊菊酸的非树状半抗原分别连接到L-Lysine的ε-氨基和α-氨基上形成0-代的双簇树状半抗原FA-Lys(PA)-OH。将上述所有半抗原与载体蛋白BSA偶联制备成人工抗原。分步将对硫磷和氰戊菊酸半抗原偶联在同一载体蛋白BSA上制备非树状多簇抗原FA-Hapl-BSA-PA-Hapl。 2.抗原免疫效果及其抗体特性分析对获得的多克隆抗体用间接ELISA法进行检测分析，比较了非树状免疫抗原与单簇树状免疫原的免疫效果，结果显示：(1)对硫磷非树状抗原获得的特异性抗体效价为6.4×104，检测限(LOD)为0.59 ng mL-1，IC50为36.0 ng mL-1，线性范围(IC20-IC80)为2.62-320.54 ng mL-1；0-代树状抗原获得的对硫磷特异性抗体的效价为7.2×104，其LOD为18.31 ng mL-1，IC50为205.16 ng mL-1，线性范围为46.71-1472.93 ng mL-1；1-代树状抗原免疫后获得的抗血清效价极低(效价小于1000)。表明树状抗原对某些分析物可以提高其免疫原性，但在提高灵敏度、亲合力方面还有待进一步探索。(2)氰戊菊酸非树状抗原获得的特异性抗体效价为3.5×104，检测限(LOD)为5.78 ng mL-1，IC50为62.47 ng mL-1，线性范围(IC20-IC80)为16.40-2246.27 ng mL-1；0-代和1-代树状抗原免疫后检测其效价都很低(效价小于1000)。(3)非树状多簇抗原FA-Hapl-BSA-PA-Hapl，免疫获得的抗体只能对对硫磷这一种药物有很好的识别，其LOD为2.23 ngmL-1，IC50为74.77 ng mL-1，线性范围分别为7.88-519.50 ng mL-1。(4)树状抗原FA-Lys(PA)-BSA，免疫动物后成功获得了能同时识别对硫磷和氰戊菊酸的高效价的双特异性多克隆抗体，进一步采用间接竞争ELISA法分析了该多克隆抗体对氰戊菊酸和对硫磷的双特异识别特性，结果显示：对氰戊菊酸和对硫磷的LOD分别为5.15 ngmL-1、2.22 ng mL-1，IC50分别为209.95 ng mL-1、42.45 ng mL-1，线性范围分别为18.29-1079.10 ng mL-1、7.02-563.01 ng mL-1。这说明双簇(或多簇)树状抗原免疫策略是制备双特异乃至多特异性多克隆抗体有效途径，并为基于此类抗体的多分析质残留同时检测的免疫分析方法提供新思路。