目的:缺血性脑卒中伴随着高致残率和致死率,严重危害人类的生命健康。脑缺血再灌注损伤涉及复杂的病理生理机制,炎症级联反应在其中起着关键作用。NLR（NOD-like receptors）家族作为固有免疫的一部分,参与炎症小体的形成;作为NLR家族新成员的NLRP6（Nod-like receptor protein six）,本团队前期研究已证实其参与形成炎症小体,通过促炎作用影响脑缺血再灌注损伤。因此探讨调控NLRP6炎症小体活化的机制尤为重要。BRCC3（人同源BRCC36）,作为一种去泛素化酶,可特异识别并水解泛素之间通过K63位点连接所形成的聚泛素链,在血管生成、肿瘤发生、炎症反应等过程中发挥重要作用。NLRP6炎症小体已被证实在肠道炎症中通过泛素化修饰介导其激活。因此,本研究关注BRCC3调控NLRP6炎症小体激活的机制,这可能成为脑缺血再灌注损伤潜在的治疗靶点。方法:（1）为明确BRCC3对脑缺血再灌注损伤后NLRP6炎症小体活化、下游炎症因子和焦亡的影响,分别用健康雄性C57BL/6J小鼠和HT22细胞来制备脑缺血再灌注损伤的体内模型（C57BL/6J小鼠大脑中动脉栓塞1h/再灌注24h）和体外模型（HT22细胞氧糖剥夺4h/复糖复氧24h）。在此基础上,小干扰RNA（si RNA）通过侧脑室注射和转染分别被用来敲低大脑皮质和HT22细胞中BRCC3的蛋白表达。（2）为了探究BRCC3和NLRP6之间的关系,干预BRCC3之后,我们检测了神经功能缺损、NLRP6炎症小体和下游炎症因子以及焦亡指标。（3）为了探究BRCC3通过NLRP6影响炎症小体活化和焦亡,我们在过表达BRCC3的基础上使用NLRP6 si RNA进行回复实验。（4）为了探究BRCC3调控NLRP6的作用机制,我们构建了BRCC3、NLRP6、Ub和ASC的质粒以及BRCC3-N和BRCC3-C截短体。结果:（1）敲低BRCC3不仅可以明显地减小脑梗死体积和神经功能评分、改善大脑皮质的HE和Nissl染色结果,还可以显著地抑制NLRP6炎症小体的活化和下游炎症因子（cleaved-caspase-1和cleaved-IL-1β）以及焦亡指标GSDMD-N的蛋白表达。与此同时,在BRCC3主要分布的神经元中,转染BRCC3 si RNA后,NLRP6炎症小体的活化和下游炎症因子（cleaved-caspase-1和cleaved-IL-1β）以及焦亡指标GSDMD-N的表达均减少。（2）过表达BRCC3的基础上敲低NLRP6,下游炎症因子和焦亡指标GSDMD-N出现回复。（3）神经元细胞系中BRCC3和NLRP6表现为共定位。（4）外源性BRCC3和NLRP6存在相互作用,且截短体BRCC3-N和BRCC3-C端均与NLRP6有互作关系。（5）BRCC3可以显著降低NLRP6的泛素化水平。（6）BRCC3可促进NLRP6和ASC的结合。结论:BRCC3可促进NLRP6炎症小体的活化,诱导体内外炎症反应和焦亡;BRCC3可能通过泛素化介导NLRP6炎症小体的活化。