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背景胆固醇是一种环戊烷多氢菲的衍生物,又称胆甾醇。胆固醇在体内有着广泛的生理作用,是细胞膜的重要组成成分和性激素合成的前体物质,是动物体内重要的营养物质。但当其过量时可能会导致高胆固醇血症,对机体产生不利的影响,因此评估胆固醇摄入量一直是营养学领域的热点问题。我国多采用食物成分表中胆固醇成分数据进行居民膳食胆固醇摄入量的评估。我国食物成分表中胆固醇成分的数据是采用GB/T5009.128-2003分光光度法得到。随着色谱检测技术的发展,气相色谱(GC),液相色谱(HPLC)技术广泛应用于食物成分数据的检测,胆固醇的相关的色谱方法也不断推出,其中,GB/T22220-2008(液相色谱法)在我国食品胆固醇检测中应用较广。检测技术的改变有可能会带来成分数据的变化,因此有必要评估由于测定方法的改进带来的居民膳食胆固醇摄入量评估的偏倚性。目的建立胆固醇检测的超高效液相色谱(UPLC)方法,通过2x2析因实验设计,方法学参数比较确定胆固醇测定的改进方法,并评估胆固醇测定方法的改进对居民膳食摄入量估算结果的偏倚性。研究方法1胆固醇测定的改进方法确定建立UPLC法测定胆固醇,通过2x2析因实验,以肉类,蛋类,奶类为样品基质,按照方法学要求比较方法的精密度、准确度和灵敏性。2食物成分数据变化的食品类别的确定对照2002版食物成分表中相关食品类别采用一对一原则分别用分光光度法和UPLC法检测胆固醇,统计分析差异性。3胆固醇测定技术的改进对居民膳食摄入量估算结果的偏倚性分析以2011-2012年北京市人群膳食调查数据,分别采用分光光度法和胆固醇测定的改进方法新测的肉、蛋、奶类样品胆固醇含量数据替代原食物成分表中的数据,用不同数据来源库进行胆固醇摄入量的计算,统计分析结果的差异性。4统计方法用Excel 2013对数据进行编辑,采用SPSS19.0建立数据库并进行统计分析。正态分布数据采用均数加减标准差,组间比较采用t检验和方差分析,非正态分布数据,采用中位数(下四分位数-上四分位数)形式描述,组间比较采用秩和检验。差异性检验标准：P<0.05为差异具有统计学意义。结果1.胆固醇测定的改进方法为UPLC法,分光广度法和UPLC法的方法学参数：a分光光度法方法学参数：方法线性范围9.0ug/mL-35ug/mL,线性方程为y=0.0037x+0.0440,R=0.9997,方法定量限11.2mg/100g。肉样品在三个水平下中胆固醇平均回收率为85.8%,84.0%,89.7%；蛋黄样品在三个水平下胆固醇平均回收率为101%,107%,111%；奶粉样品在三个水平下胆固醇平均回收率为96.3%,111%,114%。肉,蛋,奶中胆固醇的RSD分别为5.35%,7.11%,6.69%。b.UPLC法方法学参数：方法线性范围10.0-300μg/mL,线性方程y=3.34×103 x-5.63×103,R=0.9999,方法定量限3.50mg/100g,肉样品在三个水平下中胆固醇平均回收率为90.8%,89.3%,90.7%；蛋黄样品在三个水平下胆固醇平均回收率为95.4%,97.8%,98.77%；奶粉样品在三个水平下胆固醇平均回收率为89.8%,92.2%,95.5%；肉,蛋,奶中胆固醇的RSD分别为2.74%,3.68%,3.25%。2.2011-2012年北京市人群膳食胆固醇主要来源食品类别依次为蛋类69.9%,肉类25.7%,奶类2.79%。UPLC法与原分光光度法在肉类和奶类的检测结果没有显著性差异(P>0.05),在蛋类食品的检测结果存在显著性差异(P<0.05)。3.胆固醇主要膳食来源食品经分光光度比色法检测后与原食物成分表相关食品类别数据统计分析,蛋类食品胆固醇成分发生了改变(P<0.05),而肉类和奶类胆固醇成分没有发生改变(P>0.05)。4.检测技术的改进UPLC法对于居民胆固醇膳食评估摄入量的偏倚是存在的,数据升高了16.6%(P<0.05),食物(蛋类)胆固醇含量水平降低了12.0%(P<0.05)。提示开展定期的食物成分监测以及有效评估分析技术带来的数据偏倚是十分必要的。结论1. UPLC法和分光光度法在蛋类食品的检测结果有统计学显著性差异(P<0.05),UPLC法检测结果高于分光光度法。2.蛋类食品的食物成分自身发生了变化(P<0.05),用分光光度法检测数据低于2002版食物成分表相关蛋类食品数据。3.胆固醇测定技术的改进即UPLC法对居民膳食摄入量估算结果较分光光度法对居民膳食摄入量估算结果偏高16.6%。