数字化成型的金属修复体对肝肾组织影响的体内研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liujifanhua
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目的:本课题拟在构建比格犬上颌金属支架修复模型的基础上,研究两种数字化成型的金属修复体在体内戴用后对肝肾功能、肝肾组织中金属离子蓄积及生物学效应的影响,为临床诊疗工作中选用不同数字化成型的金属修复体提供实验依据和指导。方法:(1)按照随机区组法将9只比格犬分成3组,分别为钴铬(Cobaltchromium,Co-Cr)合金组、钛金属(Commercially pure titanium,CP-Ti)组、空白对照组。将选区激光熔融(Selective laser melting,SLM)制作的钴铬合金支架和计算机数控铣削(Computer numeric controlled milling,CNC milling)制作的钛金属支架固定于比格犬上腭,构建上颌金属支架修复动物模型。并于金属支架戴后0天、3天、1周、2周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月时间点采集血液样本,离心获取血清后应用全自动生化分析仪检测各项肝肾功能指标变化情况。(2)在第6月时间点采集血液样品后处死比格犬,收集肝脏和肾脏组织。部分组织消解处理后,采用电感耦合等离子体质谱仪(Inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)精准检测各组肝肾组织中金属离子的种类和浓度。(3)部分组织进行固定包埋制成组织切片后,使用H&E(Hematoxylin-eosin)染色法镜下观察数字化成型的金属修复体对肝肾组织病理的影响。应用TUNEL(Td T-mediated d UTP nick-end labeling)法检测肝肾组织凋亡水平,通过比较各组细胞凋亡率大小,研究两种数字化成型的金属修复体对肝肾组织凋亡水平的影响。(4)部分组织提取总蛋白后,应用蛋白质印迹法(Western blot)检测组织样品中自噬相关蛋白P62和Beclin1的表达,通过对比各组目的蛋白的表达量,分析两种数字化成型的金属修复体对肝肾组织自噬水平的影响。结果:(1)肝肾功能指标检测结果表明不同时间点肝肾功能水平的差异均具有统计学意义(P均<0.05),戴用时长与分组均无交互作用(P均>0.05),SLM Co-Cr组、CNC milled CP-Ti组与空白对照组的肝肾功能水平差异显示均不具有统计学意义(P均>0.05)。(2)ICP-MS检测结果显示SLM Co-Cr组和CNC milled CP-Ti组肝肾组织中检出金属离子种类与空白对照组相同,且各金属离子浓度及金属离子总浓度与空白对照组的差异均不具有统计学意义(P均>0.05)。(3)SLM Co-Cr组和CNC milled CP-Ti组的肝脏和肾脏组织结构未见明显异常,且和空白对照组对比均不具有显著差异。(4)TUNEL法结果表明SLM Co-Cr组和CNC milled CP-Ti组肝肾组织中细胞凋亡率均略高于空白对照组,但各组间差异显示不具有统计学意义(P均>0.05)。(5)Western blot法结果表明SLM Co-Cr组、CNC milled CP-Ti组与空白对照组肝肾组织中目的蛋白P62和Beclin1相对表达量的差异显示均不具有统计学意义(P均>0.05)。结论:在实验观察期内,两种数字化成型的金属修复体即SLM Co-Cr和CNC milled CP-Ti对肝肾功能、肝肾组织中的金属离子种类和浓度、组织病理、细胞凋亡和自噬水平均无显著性影响,具有良好的生物相容性。
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