纳豆激酶的溶栓作用及其机理研究

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目的:通过纳豆激酶(NK)的体内和体外溶解血栓实验,探讨NK的溶栓作用及其机理。方法:1.纳豆激酶肠溶胶囊灌胃给药对正常大鼠纤溶系统的影响研究:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、蚓激酶组(80mg/kg)、NK低(2000FU/kg)、中(4000FU/kg)和高(6000FU/kg)剂量组,每天灌胃给药1次,连续给药15次,末次给药4h后,腹主动脉取血并制备血浆,测定纤溶相关指标:优球蛋白溶解时间(ELT)、纤溶酶原(PLG)活性、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的含量和活性,D-二聚体(D-dimer)、纤维蛋白原(FBG)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)含量。2.纳豆激酶肠溶胶囊灌胃给药对自体血栓栓塞模型大鼠纤溶系统的影响研究:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、蚓激酶组(80mg/kg)、NK低(2000 FU/kg)、中(3000 FU/kg)和高(4000 FU/kg)剂量组,每天灌胃给药1次,连续给药15次,末次给药3 h后制备大鼠自体血栓栓塞模型,术后4 h腹主动脉取血并制备血浆,测定纤溶相关指标(同1)。3.纳豆激酶的体外溶栓作用机理研究:采用纤维蛋白平板法,探究NK降解纤维蛋白的作用方式,并探讨NK对纤维蛋白原的降解情况。4.静脉注射纳豆激酶对兔股动脉内血栓的溶解作用研究:将NK分为5个剂量组:NK 1600、800、400、200、100 FU/kg。各组家兔股动脉双侧均制备血栓模型,于血栓形成30min后,耳缘静脉给药1次,给药24h后取动物血栓段拍照,测量血栓长度和直径,分别称量血栓总重(由血栓部位血管、血栓及血栓外液体构成)和血栓湿重。结果:1.纳豆激酶肠溶胶囊灌胃给药对正常大鼠纤溶系统的影响:与正常对照组比较,NK中剂量组大鼠血浆ELT明显缩短(P<0.05);NK低、中剂量组D-dimer含量明显升高(P<0.05),NK中、高剂量组PAI-1活性明显降低(P<0.01);而各给药组大鼠血浆中t-PA、PAI-1、FDP、FBG的含量及PLG、t-PA活性均无显著性差异。2.纳豆激酶肠溶胶囊灌胃给药对自体血栓栓塞模型大鼠纤溶系统的影响:与模型对照组比较,NK低剂量组大鼠血浆ELT明显缩短(P<0.01);NK给药组大鼠血浆中t-PA、FDP和D-dimer的含量明显增高(P<0.05或P<0.01);NK中剂量组PAI-1含量明显降低(P<0.05),其他组均有降低趋势;而各给药组大鼠血浆中t-PA、PAI-1和PLG的活性及FBG含量均无显著性差异。3.纳豆激酶的体外溶栓作用机理:NK直接降解纤维蛋白占90.42%,其通过激活纤溶酶原间接发挥溶解的作用占9.58%。4.静脉注射纳豆激酶对兔股动脉内血栓的溶解作用:与模型对照组比较,NK 1600、800 和 400 FU/kg 组血栓长度明显变短(P<0.01 或P<0.05);NK 1600 和800FU/kg组血栓总重与血栓湿重明显减少(P<0.05)。各给药组与模型对照组比较,血栓直径无显著性差异。结论:1.NK溶栓的主要作用机理是通过直接溶解作用来降解纤维蛋白,并且NK具有较强的、持续的溶栓作用。2.NK对兔股动脉血栓的溶解作用具有剂量依赖性。静脉注射NK浓度低于400 FU/kg时,无明显溶解血栓的作用,而当NK 800~1600FU/kg,呈现溶栓作用。
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