目的：探讨P物质（Substance P，SP）对人胚肺成纤维细胞（MRC-5）增殖与活化的作用及其调控机制，进一步揭示P物质参与肺间质纤维化中的作用机理，为临床治疗肺间质纤维化的药物研究与开发提供新的思路。
　　方法：体外培养人胚肺成纤维细胞（MRC-5），取对数生长期的细胞为研究对象，展开以下研究:（1）以系列浓度（1、10、100、1000、10000nM）的P物质处理MRC-5细胞，利用CCK8法检测系列浓度的P物质在不同时间点（24、48、72h）对MRC-5增殖活性影响。从而筛选出P物质对MRC-5细胞的最佳作用浓度及时间。（2）利用天狼猩红染色检测系列浓度的P物质在72h时MRC-5细胞分泌胶原纤维含量变化。（3）使用Western blot检测系列浓度的P物质在72h时MRC-5细胞对α-SMA蛋白表达的影响。（4）在此基础上，我们将细胞分为三个组，分别是对照组、100nM P物质组（简称P物质组）、100nM P物质+10μM L732138组（NK-1R抑制剂）（以下简称P物质+L732138组），将以上三组细胞培养72h后，分别以CCK8法检测各组细胞增殖活性，用天狼猩红染色检测各组细胞分泌胶原纤维的含量变化，利用Western blot检测各组细胞α-SMA蛋白表达的变化，从而阐明P物质对MRC-5细胞的增殖及活化作用。（5）为研究P物质对MRC-5细胞的作用机制，将对照组、P物质组、P物质+L732138组三组细胞体外培养72h，利用Western blot检测各组细胞TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白的表达变化。（6）为进一步检测SP/NK-1R在TGF-β1/Smad3信号通路中的作用，我们再次将细胞分为三个组，分别是对照组、100nM P物质组（简称P物质组），100nM P物质+10μM SB431542组（TGFβR1抑制剂）（以下简称P物质+SB431542组），分别以CCK8法检测各组细胞增殖活性，用天狼猩红染色检测各组细胞分泌胶原纤维的含量变化。
　　结果：（1）MRC-5细胞经系列浓度（1、10、100、1000、10000nM）P物质处理后，24h后OD值无明显变化；与对照组比较，在处理48h及72h后，100nM P物质组细胞OD值均升高，其中以72h时OD值升高更为明显（P＜0.01）。（2）MRC-5细胞经系列浓度P物质处理72h后，与对照组比较，100nM P物质组处理的细胞胶原纤维含量明显增多（P＜0.001）。（3）经系列浓度P物质处理72h后，与对照组比较，10nM P物质组及100nM P物质组细胞α-SMA蛋白相对表达水平均增高，其中以100nM P物质组增高更为显著（P＜0.001）。（4）细胞经药物处理72h后，与P物质组比较，P物质+L732138组细胞胶原纤维含量显著减少（P＜0.001）、细胞OD值及?-SMA蛋白相对表达量均明显降低（P＜0.01）。（5）细胞经药物处理72h后，与P物质组比较，P物质+L732138组细胞TGFβ1、p-Smad3蛋白相对表达量均明显降低（P＜0.01）。（6）细胞经药物处理72h后，与P物质组比较，P物质+SB431542组细胞OD值、胶原纤维含量均明显降低（P＜0.001）。以上差异均有统计学意义。
　　结论：P物质可促进人胚肺成纤维细胞（MRC-5）增殖及活化，其机制可能与TGF-β1/Smad3信号通路有关。