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目的:了解不同浓度的MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞不同时间后引发其吞噬功能的变化及其相关细胞因子NO、IL-6、IL-10、TNF-α含量的变化,从而为家蝇抗真菌肽MAF-1早日开发成为新型药物得以应用于临床提供实验依据。 方法:1.采用中性红法对经 MAF-1A体外作用后的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能进行测定2.采用硝酸还原酶法对经不同浓度MAF-1A,不同体外作用时间后的小鼠腹腔巨噬细胞 NO分泌水平的检测3.经酶联免疫吸附实验对经不同浓度MAF-1A,不同体外作用时间后的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL-10分泌量进行检测4.采用实时荧光定量 PCR的方法对经不同浓度MAF-1A,不同体外作用时间后的小鼠腹腔巨噬细胞 TNF-α基因表达量的检测。 结果:1.100ug/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用24h后的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力上升,其吞噬率与对照组相比 P<0.05,具有统计学意义。2.100ug/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h、12h后其相关细胞因子NO的含量升高,与对照组相比P<0.05。相同浓度组作用小鼠腹腔巨噬细胞24h后,100ug/ml、50ug/ml浓度组 MAF-1A能引起NO含量的升高,与对照组相比P<0.05。3.100 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h后其相关细胞因子TNF-α分泌量增加,与对照组相比P<0.05;各浓度组MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞12h后其相关细胞因子 TNF-α分泌量增加,与对照组相比P<0.05。100ug/ml、50ug/mlMAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞24h后其相关细胞因子 TNF-α分泌量增加,与对照组相比 P<0.05。4.100 u g/m l、50 u g/m l、25 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h、12h、24h后其相关细胞因子 IL-6、IL-10分泌量对照组相比无明显变化,P>0.05。5.100 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h后,其分泌的细胞因子TNF-α基因表达量上调,P<0.05。其余条件下,TNF-α的基因表达量与阴性对照组相比无明显变化,P>0.05。 结论:1.经100ug/ml、50ug/ml、25ug/mlMAF-1A作用24h后的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力上升,吞噬率增高,即MAF-1A可活化小鼠腹腔巨噬细胞,调节免疫反应。2.不同浓度 MAF-1A作用小鼠腹腔巨噬细胞不同时间可使小鼠腹腔巨噬细胞相关细胞因子NO、TNF-α的含量升高,但 IL-6、IL-10含量无明显变化;100 u g/m l MAF-1A作用于小鼠腹腔巨噬细胞6h后TNF-α基因表达量上调,其他条件下TNF-α基因表达量均无明显变化。