第一节共聚焦微束X射线荧光检测大鼠肝纤维化过程中的肝铁沉积实验目的:通过腹腔注射硫代乙酰胺溶液来构建大鼠的肝纤维化模型,利用共聚焦微束X射线荧光分析技术检测大鼠肝纤维化过程中不同时间点肝组织内铁元素的含量和分布情况。实验方法:实验过程中选择2月龄的SD大鼠14只,将这部分大鼠进行随机分组（对照组和实验组）,其中每组各7只。实验组通过对大鼠持续性腹腔注射配置好的4%的硫代乙酰胺溶液来诱使其发生肝纤维化,同时对照组的大鼠进行相同剂量生理盐水的注射,两组大鼠均自第5周起在注射4%的硫代乙酰胺溶液或生理盐水的基础上,每周加注射一次相同剂量的磷酸缓冲盐溶液,注射过程中及时监测两组大鼠的体重变化情况。两组都在开始注射硫代乙酰胺或生理盐水后的第0小时、第7天、第14天、第21天、第28天、第42天、第56天各自解剖一只大鼠,每只大鼠均切取部分肝脏组织进行共聚焦微束X射线荧光检测,并且对第56天对照组和实验组取出的部分大鼠肝脏切片进行苏木精-伊红染色来检测其肝纤维化情况。实验结果:观察第56天时的苏木精-伊红染色结果,发现对照组大鼠的肝组织无明显纤维化,而实验组大鼠第56天肝组织切片中有纤维胶原形成。共聚焦微束X射线荧光光谱图表明大鼠肝脏组织中含有铁、钾、锌等金属微量元素,其中铁元素的含量相对高于另外两种元素。此外,实验组的共聚焦微束X射线荧光检测发现随着注射硫代乙酰胺次数的增加,大鼠肝组织中的铁沉积也逐渐增多。实验结论:利用硫代乙酰胺试剂注射SD大鼠可导致肝纤维化的形成。共聚焦微束X射线荧光可以检测生物样本中的几种不同元素,并且通过该方法能够半定量地评价大鼠肝纤维化过程中的铁沉积。经多次腹腔给药（硫代乙酰胺试剂）引起的大鼠肝纤维化过程中,铁沉积与肝损伤在一定程度上呈正相关。共聚焦微束X射线荧光分析技术可以直观、清晰地展现肝组织中铁元素的二维分布。第二节共聚焦微束X射线荧光评估骨髓间充质干细胞减轻肝纤维化过程中肝铁沉积的价值实验目的:在持续性多次输注硫代乙酰胺溶液诱导实验大鼠发生肝纤维化病变的过程中,为其尾静脉输注大鼠骨髓间充质干细胞,利用共聚焦微束X射线荧光技术评估大鼠骨髓间充质干细胞降低肝铁沉积、减轻纤维化的效果。实验方法:自大鼠的四肢骨中得到动物注射所需的骨髓间充质干细胞,通过多种检测方法鉴定所提取细胞的生物特性,然后随机选取7只2月龄的SD大鼠,所有大鼠连续性8周进行硫代乙酰胺试剂的给药,自第5周起,剩余大鼠在注射硫代乙酰胺的基础上尾静脉注射一次大鼠骨髓间充质干细胞,在整个动物打药过程中,及时监测大鼠的体重变化。在注射硫代乙酰胺后的不同时间点（第0小时、第7天、第14天、第21天、第28天、第42天、第56天）各自解剖一只大鼠,每只大鼠均选取部分肝脏组织进行共聚焦微束X射线荧光检测,另外对第56天的大鼠肝组织进行苏木精-伊红染色,观察纤维化程度。实验结果:苏木精-伊红染色显示相对于第一部分实验中仅注射硫代乙酰胺的大鼠,注射大鼠骨髓间充质干细胞后,肝组织中胶原纤维显著减少,肝纤维化程度明显减轻。共聚焦微束X射线荧光光谱图可见在0小时至28天时,肝铁沉积仍然呈上升趋势,但在第42天至第56天时,大鼠肝脏中的铁沉积有明显下降的趋势。实验结论:共聚焦微束X射线荧光分析技术可以有效地检测肝纤维化过程中肝铁沉积的变化情况。苏木精-伊红染色和共聚焦微束X射线荧光检测共同证明了自大鼠骨髓中提取的间充质干细胞可以降低肝纤维化过程中的肝铁沉积,一定程度上能够缓解肝组织的损伤,修复肝纤维化。