【摘 要】
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愈创蓝油烃是一种从植物中提取的烃类天然组分,具有促进皮肤伤口愈合的治疗作用。但是多年以来,对其治疗原理的研究甚少。为了探究愈创蓝油烃对皮肤创口的愈合作用及其原理,促进其开发与利用,实验将体重在220±20 g的60只健康SD雄性大鼠,利用外科手术方法在其背部制备2个直径为10 mm全皮缺损伤口模型,随机分为模型对照组和蓝油烃治疗组。于手术当天,模型治疗组在其伤口处涂抹蓝油烃膏剂,模型对照组涂抹凡士
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愈创蓝油烃是一种从植物中提取的烃类天然组分,具有促进皮肤伤口愈合的治疗作用。但是多年以来,对其治疗原理的研究甚少。为了探究愈创蓝油烃对皮肤创口的愈合作用及其原理,促进其开发与利用,实验将体重在220±20 g的60只健康SD雄性大鼠,利用外科手术方法在其背部制备2个直径为10 mm全皮缺损伤口模型,随机分为模型对照组和蓝油烃治疗组。于手术当天,模型治疗组在其伤口处涂抹蓝油烃膏剂,模型对照组涂抹凡士林软膏,连续给药21 d,于第0、3、7、14、21 d拍照,使用Image J软件测算创口愈合率。于术后0、3、7、14、21 d,分别取伤口周边的皮肤用于HE染色,光镜观察其病理变化;Masson染色观察胶原组织,应用ImagePro软件测定伤口处胶原沉积率;免疫组化法检测CD-34,应用Image-Pro软件测定伤口处微血管密度。ELISA法测定不同时间和组别伤口组织中白细胞介素IL-1α、髓过氧化物酶(MPO)、前列腺素E2(PGE-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。RT-QPCR检测转化生长因子TGF-β1、Smad2、Smad3、血管内皮生长因子VEGF、肝细胞生长因子HGF、表皮生长因子EGF、成纤维细胞生长因子FGF-7的m RNA相对表达量。western blot检测TGF-β1、VEGF表达量。结果:蓝油烃治疗组伤口愈合比模型对照组伤口愈合快,其中7 d时两者愈合率差异显著(P<0.05)。HE染色显示蓝油烃治疗组的伤口在7 d时结缔组织数目较多,炎性浸润程度较弱,Masson染色显示在全部的时间点上蓝油烃治疗组大鼠伤口胶原沉积率高于模型组,14 d时差异显著(p<0.05)。CD-34免疫组化显示3 d和7 d时蓝油烃治疗组创口微血管密度均高于模型对照组,蓝油烃治疗组分别为88±24和54±18.19个/视野,模型对照组分别为68±38.35和42.33±9.61个/视野,但14 d时又小于模型对照组(p<0.05)。3 d时,治疗组结果显示IL-1α为9.78ng/L差异低于模型对照组的17.48 ng/L(p<0.05);蓝油烃治疗组PGE-2浓度在3 d和7 d时分别为7.94 ng/L和7.12 ng/L显著低于模型对照组的8.68和7.21(p<0.05);蓝油烃治疗组TNF-α浓度在7 d时为19.93 ng/m L显著低于模型对照组的26.67ng/m L(p<0.05)。RT-QPCR显示治疗组VEGF的m RNA在全部时间点上调,3d时差异显著(p<0.05),相对表达量为(4.04±0.49):(2.00±0.13);FGF的m RNA蓝油烃治疗组全部时间点上调,14 d时相对表达量为(7.44±0.32):(4.53±1.02),差异显著(p小于0.05);蓝油烃治疗组HGF的m RNA在全部时间点上调,3d时差异显著(p<0.05),(5.22±0.39):(3.86±0.37);蓝油烃治疗组TGF-β1的m RNA水平在全部时间点上调,7 d时差异显著,(7.41±0.54):(5.15±0.30)(p<0.05);其下游因子Smad2和Smad3也均有上调,Smad3在3 d和7 d时差异显著。Western blot显示VEGF和TGF-β1表达均上调。结论:愈创蓝油烃通过抑制炎症,提升生长因子表达,促进胶原合成,从而综合作用,加快皮肤创伤修复。
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