硒是生命必需的元素。在世界的某些地区,观察到的硒不足会增加发生各种疾病的可能性。目前,富硒酵母,主要是酿酒酵母,是公认的膳食补充剂,用于补充全世界人类硒的缺乏。富硒酵母生产中的一个重要挑战是硒的毒性,它会导致酵母细胞生物量的减少。在此,本课题研究了高达 250 mg/L 的盐浓度下各种亚硒酸盐对酿酒酵母 BY4741生长的影响,以确定合适的亚硒酸盐浓度。数据显示,在 100mg/L 时,酵母 细胞生长足以提供足够的细胞生物量,约为0.4g/L。因此,100 mg/L是用 于处理酵母细胞以进行进一步研究的最高浓度。其次,为了指导富硒酵母的生产,本课题探索了酵母富硒的潜在机制。采用ICP-AES检测亚硒酸盐对磷、硫、钾、钙、钠、镁、锌、铁、硒等9种必需离子含量的影响。数据表明,亚硒酸盐能显着降低钠、钾、镁、磷的含量。考虑到细胞内必需离子,尤其是钠、钾、镁的失衡,可能会影响细胞膜的通透性,这可能是对细胞产生毒性的主要原因。另一方面,我们想知道硒是否可以通过磷转运蛋白转运到酵母细胞中,以及这是否由于它们之间的竞争而减少了对磷的吸收。因此,本课题研究了亚硒酸盐对磷转运蛋白（pho87Δ、pho90Δ、pho84Δ、pho89Δ、p ho5Δ、pho4Δ、pho86Δ）中单个突变体生长的影响。同时,由于硒和硫的相似性,我们还研究了亚硒酸盐对硫转运蛋白突变体（met15Δ、sul1Δ和sul2Δ）生长的影响。数据显示pho87Δ菌株对亚硒酸盐具有显着的抗性,表现出最高的生长速率和干细胞重量。我们假设PH087在高浓度亚硒酸盐吸收中起主要作用。为了验证这一假设,本课题建立了一种有效的毛细管区带电泳方法来测量硒水平。由于难以检测细胞内硒,因此通过测量培养后培养基中亚硒酸盐水平的变化来评估酵母生物质中的总硒浓度。在85 mM Na2HPO4和0.5 mM CTAB（pH 9.37）的混合缓冲液、-5 kV分离电压和1.0 psi × 30 s注入200 nm的条件下,亚硒酸盐的检测可以在7.9分钟内完成。标准品的校准曲线线性范围为0～300mg/L（r2=0.9999）,回收率为101.76%。我们通过这种方法测量了野生型和pho87Δ菌株的总硒含量。数据显示pho87Δ中的硒含量低于野生型。因此,我们认为PHO87过表达将有助于增加硒的积累。构建了过表达PHO87的菌株,它表现出细胞对亚硒酸盐的敏感性增加。总之,本课题研究了酵母富集硒的潜在机制。结果表明,磷转运蛋白PH087参与了酵母中硒的积累。同时,我们开发了一种有效的毛细管区带电泳方法来测定酵母细胞中的硒水平。该方法易于样品采集和检测,有助于指导富硒酵母的生产。