保山赤芝中杂萜的定向获取及体外抗肾纤维化探究

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灵芝,具有补中益气、滋补强壮,扶正固本之功效,作为中药使用已有2000多年的历史。长期以来,三萜和多糖被人们认为是灵芝的主要药效物质。而近些年,随着各种类型杂萜及其药理活性的不断发现,表明杂萜是灵芝中另一大类重要的成分。赤芝系灵芝属药用真菌,作为药物已正式被国家药典收载。本文以500.0千克保山赤芝干燥子实体为研究对象,采用MCI gel CHP 20P、凝胶柱色谱、正相和反相硅胶柱色谱、制备薄层色谱、制备和半制备型高效液相色谱等手段,利用一维和二维核磁共振波谱法、紫外-可见吸收分光光度法、圆二色谱法及高分辨质谱等方法共分离和鉴定出化合物52个,除化合物15外,其余均为芳香杂萜化合物。其中包括新成分23个,为化合物1–5,8,11–12,18,21,28,31–33,35–36,38,40–41,43–44,47,52,化合物28和38为新碳骨架杂萜;已知且被命名的化合物为spiroapplanatumine K(6),cyclo(Phe Tyr)(15),applanatumol S(16),spirolingzhine D(20),fornicin B(22),cochlearol D(23),dayaolingzhiol B(26),ganomycin I(27),australin B(29),spiroapplanatumine G(39),petchiene A(42),spirolingzhine B(46),spirolingzhine A(48),oregonensin A(49),spirolingzhine B(51)。另外,对部分具有手性的化学成分进行手性分析,发现以外消旋体形式存在的居多,对化合物32和33进行手性拆分获得了各自的对映体,并用ECD计算的方法确定了它们的绝对构型。通过对部分化合物的抗肾纤维化功能研究,发现化合物31和(+)-32能够抑制由TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞纤维化过程中纤维黏连蛋白和胶原蛋白Ι的表达,且具有浓度依赖效应。进一步研究显示化合物31可以抑制Smad2蛋白磷酸化。本研究不仅丰富了灵芝杂萜成分的类型,也进一步揭示了灵芝在肾脏保护方面的功效。杂萜成分的外消旋现象和具体药理作用机制等问题有待深入研究。
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