近年抗生素滥用、防腐剂超标等问题络绎不绝,急需找到一种无害、无残留、无耐药性并且高效的替代品。细菌素为细菌产生的具有抗菌能力的蛋白或多肽,它具有代替抗生素与防腐剂的巨大潜力。植物乳杆菌是一类食品级的益生菌,本研究找到一株产细菌素的植物乳杆菌LZ222,并成功分离纯化得到细菌素PLZ222,并就其稳定性、抑菌活性、作用机理进行了研究。为植物乳杆菌LZ222与PLZ222在生产实践中的应用提供了理论依据。内容概括如下:1、产细菌素的植物乳杆菌的筛选:通过菌落形态和溶钙圈先对乳酸菌作初步筛选,从鲜牛奶中得到一株对藤黄微球菌有抑制作用的菌株。结合形态分析和生理生化鉴定结果,与16S rDNA序列对比鉴定,将这株菌株正式命名为植物乳杆菌LZ222（Lactobacillus planta rum LZ222）。通过排酸实验与蛋白酶解实验初步判定LZ222中产生抑菌效果是一类蛋白质或是多肽即细菌素。2、植物乳杆菌PLZ222细菌素LZ222的分离纯化:利用XAD-2大孔树脂吸附柱、阳离子交换柱、HPLC的C18反相色谱柱三步纯化得到纯度为94.12%的细菌素。并结合Tricine-SDS-PAGE与质谱,根据公式计算得到细菌素的分子量为4362 Da。用BCA试剂盒测得蛋白浓度,并换算最后得到5.33 mg细菌素。最后将植物乳杆菌LZ222所产生的的细菌素正式命名为植物乳杆菌素LZ222（plantaricin LZ222,或 PLZ222）。3、PLZ222稳定性研究:当pH大于8时,PLZ222的活性在很短时间内损失巨大。PLZ222在pH高于4的情况下容易失活,在pH低于4的情况下抑菌活性保持较稳定。PLZ222在75℃及以下稳定性较好,在100℃时抑菌活性丧失较快,PLZ222的热稳定性一般。PLZ222对胰蛋白酶、胃蛋白酶非常敏感,在被处理两小时后活性几乎消失。PLZ222对木瓜蛋白酶、a-胰凝乳蛋白酶比较敏感,在被处理2小时后活性损失巨大,蛋白酶K对PLZ222的作用略微弱于其他蛋白酶。溶菌酶、a-淀粉酶、核糖核酸酶A对PLZ222的活性有一些影响,PLZ222对脂肪酶不敏感。4、PLZ222抑菌活性研究:用琼脂扩散打孔法确定PLZ222的抑菌谱。PLZ222对三株敏感菌金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、藤黄微球菌的最小抑菌浓度分别是1250 nM、750 nM、150 nM。5、PLZ222作用机理研究:利用荧光泄露法确定PLZ222的抑菌作用机制为细胞膜穿孔模式。结合PLZ222与Lipid Ⅱ结合抑菌实验,万古霉素参与的荧光泄漏实验,初步断定Lipid Ⅱ不是PLZ222作用的靶点。